羟基葛根素对脂肪细胞3TL1胰岛素抵抗的影响及其机制研究.PDF

·2352 · 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 16 期 2014 年 8 月 • 药理与临床 • 3′-羟基葛根素对脂肪细胞 3T3-L1 胰岛素抵抗的影响及其机制研究 1 2 1 1 1 1* 王小康 ，刘清霞 ，叶开和 ，魏崧丞 ，马锦锦 ，叶春玲 1. 暨南大学药学院 药理学教研室，广东 广州 510632 2. 顺德区伍仲珮纪念医院，广东 佛山 528300 摘 要：目的 探讨 3′-羟基葛根素改善胰岛素抵抗的作用及其机制。方法 采用 MTT 法检测 3′-羟基葛根素对 3T3-L1 前脂 肪细胞增殖的影响；油红 O 染色法检测其对 3T3-L1 前脂肪细胞分化的影响。以地塞米松诱导分化成熟的脂肪细胞，建立胰 岛素抵抗模型，分别采用葡萄糖氧化酶法和比色法检测细胞培养上清液中葡萄糖消耗量和游离脂肪酸（FFA ）生成量；实时 荧光定量 PCR 法分析脂肪细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体 γ （peroxysome proliferator-activated receptor gamma ，PPARγ） 和蛋白酪氨酸磷酸酶 1B （protein tyrosine phosphatase 1B ，PTP1B ）的基因表达。采用嵌合蛋白基因试验检测3′-羟基葛根素 的PPARγ配体结合活性和比色法检测其对 PTP1B 酶活性的影响。结果 与溶媒对照组相比，1～10 μmol/L 3′-羟基葛根素显 著促进 3T3-L1 前脂肪细胞增殖及细胞分化（P ＜0.05、0.01 ）。与模型组相比，无论在基础状态还是胰岛素刺激状态，3′-羟 基葛根素均能显著增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖利用率、减少 FFA 的产生（P ＜0.05、0.01 ）；同时显著上调胰岛素抵抗脂 肪细胞 PPARγ基因的表达，但对 PTP1B 基因表达无明显影响（P ＞0.05 ）。与溶媒对照组相比，3′-羟基葛根素在 0.1、10.0 μmol/L 时能对 PPARγ 产生激活作用（P ＜0.05、0.01 ），但对 PTP1B 酶活性没有明显抑制作用（P ＞0.05 ）。结论 3′-羟基葛根素能 促进胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖利用、抑制 FFA 产生，从而改善胰岛素抵抗，其机制可能与上调 PPARγ基因表达有关。 关键词：3′-羟基葛根素；3T3-L1 脂肪细胞；胰岛素抵抗；过氧化物酶体增殖物激活受体 γ；蛋白酪氨酸磷酸酶 1B 中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)16 - 2352 - 06 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.16.014 Effects of 3′-hydroxy puerarin on improving insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes and their mechanisms 1 2 1 1 1 1 WANG Xiao-kang , LIU Qing-xia , YE Kai-he , WEI Song-cheng , MA Jin-jin , YE Chun-ling 1. Department of Pharmacology, College of Pharmacy, Jinan University, Guangzhou 510632, China 2. Shunde Wuzhongpei Memory Hospital, Foshan 528300, China Abstract: Objective To investigate the effects of 3′-hydroxy puerarin on improving insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes