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- 2019-03-02 发布于江苏
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;;一、微生物分离和培养的基本理论;;;2.配制培养基
(1)培养基概念:为人工培养微生物而制备的适合微生物 、 或积累代谢产物的 。
(2)培养基类型
①天然培养基:采用动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成,如牛肉膏蛋白胨培养基。
优点: 、营养丰富、配制简便;
缺点: 难以控制、实验结果的重复性较差。;②合成培养基:由 的分析纯等级别的高纯度化学试剂加蒸馏水配制而成,如葡萄糖铵盐培养基。
优点:化学成分及其含量 、实验的可重复性好;
缺点:配制繁琐、成本较高。
(3)培养基成分:一般都含有 、 (提供碳元素的物质)、 (提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。
(4)培养基的配制原则:在配制培养基时,根据 的不同需要,有时还要加入维生素等特殊的营养物质,并要调节培养基的 使之满足微生物生长的需要。;3.接种微生物
(1)接种的概念:在 条件下将微生物接入 的操作过程。
(2)常用的接种工具: 、 、接种环等。
(3)接种方法
①用 进行穿刺接种。
②用接种环进行斜面接种或在固体培养基平板上进行划线接种。
③用 进行涂布平板接种等。;;2.实验室常利用高温处理达到灭菌效果,包括采用干热灭菌或湿热灭菌等方法。以下图高压蒸汽灭菌锅的使用为例,探究无菌技术的方法。;(1)高压蒸汽灭菌的使用原理是什么?
答案 使用原理:将待灭菌物品放在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内;把锅内的水加热煮沸,并把其中原有的冷空气彻底驱尽后将锅密闭;再继续加热就会使锅内的蒸汽压逐渐上升,从而温度也随之上升到100 ℃以上。
(2)简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用步骤。
答案 加水、装锅、加热排气、保温保压、出锅等。;(3)消毒和灭菌的原理是什么?消毒和灭菌都能杀死所有的微生物吗?是否适用于所有的生物和物品?
答案 ①都是使微生物的蛋白质变性,借此杀死微生物。
②灭菌可杀死处理材料中的全部微生物(包括芽孢和孢子),而消毒仅能杀死物体表面或内部的部分微生物(一般不包括芽孢和孢子)。
③不是,无菌技术既要考虑效果,又要考虑操作对象的承受能力。例如,活体生物材料、操作者的双手等只能消毒,而不能灭菌。
(4)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?
答案 还能有效避免污染环境以及操作者自身被微生物感染。;3.微生物的培养离不开培养基,根据下面某微生物培养基的配方回答下列问题:;(1)该培养基的碳源、氮源分别是什么?
答案 碳源:C6H12O6;氮源:NaNO3。
(2)依据物理性质用途划分,该培养基属于什么培养基?
答案 依据物理性质划分,该培养基属于液体培养基;依据用途划分,则属于选择培养基。
根据培养基的原料,所培养微生物的同化作用的类型是异养型,培养的微生物可能是酵母菌或霉菌。
(3)在固体培养基中加入的琼脂能为微生物提供营养吗?为什么?
答案 不能,微生物不能分解琼脂。
(4)普通培养基能培养病毒吗?为什么?
答案 不能,因为病毒只能进行活细胞寄生生活。;;(2)培养基的成分及功能;生长因子(特殊营养物质);;解析 根据培养基的物理性质,可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基,在液体培养基中加入不同量的凝固剂如琼脂可形成半固体或固体培养基;除水以外的无机物如NH4HCO3,既可以是碳源,也可以是氮源,不仅仅提供无机盐;无机氮源有时也能提供能量,如NH3可以为硝化细菌提供能量。;;功能;;;3.平板划线分离和培养大肠杆菌
在实验室中,平板常常被用来 细菌等微生物。
(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基的平板制作
配制好的培养基装瓶 →倒平板操作(A.打开瓶塞→B.________
→C.倒培养基→D. )。
(2)平板划线分离与培养大肠杆菌
①平板划线法的含义:用带有微生物的 在平板培养基表面通过分区划线而纯化分离微生物的一种方法。
②注意事项:接种和划线操作时需要在 附近进行。;;(2)从防止杂菌污染的角度思考,平板冷凝后将平板倒置的原因是什么?
答案 平板冷凝后,皿盖上会
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