应用膜片钳技术分析17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道电流的影响.pdfVIP

10．0中进行分析及测量。实验结果用Mean+SD表示， 所有数据在pCLAMP 将给药组和对照组进行两组资料t检验分析，P0．05为差异有显著性，P0．01 为差异有高度显著性。 实验结果 1、l 7p．E2对不同膜电位下豚鼠心室肌细胞Ic和L的影响 62．9％。 较，均为P0．01，n=5)。Ica．L峰电流密度值减少百分数分别为26．8％、40％矛1 电流电压曲线显示1713．E2浓度越高抑制的程度越明显，但I．V曲线的形状和峰值 电压无明显变化。 2、TAM预处理后1713一E2对不同膜电位下Ic扣L的影响 值无显著变化(尸O．05，n=5)。 讨论 钙通道是心肌细胞膜上最重要的膜蛋白之一。根据钙通道的分子生物学及其 钙电流的动力学特征，可将其分为长时间激活型(L型)及瞬时激活型(T型)，其中 L型钙通道的开放及钙离子内流而产生的慢钙内向电流，在心肌细胞动作电位复 极和兴奋．收缩偶联过程中起重要作用，是决定心肌细胞动作电位平台期长短的重 要因素。 本研究应用膜片钳全细胞记录方法，观察了1713．E2对豚鼠心室肌细胞Ic和L的 能通过抑制Ic和L缩短动作电位平台期。抑制内向钙电流或促进外向钾电流均使动 动作电位时程缩短，导致Ca2+内流减少，心肌收缩力减弱，降低心脏作功和心肌 3 氧耗。此外，进入细胞内Ca：+降低，有利于线粒体将堆积的Ca：+排出，减轻Ca：+ 超载，发挥对心脏的保护作用。 本实验发现17p．E2用雌激素特异性受体阻断剂TAM预处理后，对Ic}L的抑 制作用与未应用TAM预处理相比没有明显变化，提示1713．E2抑制Ica．L的作用不 是由雌激素核受体介导的，推测该作用可能是通过直接与钙离子通道上或与钙通 道调节蛋白的某位点结合而发挥作用。 本实验发现生理浓度的1713．E2能够抑制Ica-L，这种抑制作用不被雌激素特异 性受体阻断剂TAM阻断，提示17p．E2对Ica-L的作用可能未通过基因转录过程， 而是直接作用于钙通道或通过其他途径发挥生物学效应。 =口结论-匕 1、1713．E2抑制豚鼠心室肌细胞Ic。-L，作用呈浓度依赖性。 2、雌激素特异性受体阻断剂TAM不能阻断17j3．E2对豚鼠心室肌细胞Ic跏L的 抑制作用，提示1713．E2对IC。．L的抑制作用可能与ER作用无关。 3、低剂量即生理浓度1713．E2即可抑制豚鼠心室肌细胞IC}L，发挥生物学效应。 关键词 膜片钳；雌激素；L．型钙通道电流；全细胞记录 4 ● 英文论著摘要 Effectsof1 on CalciumCurrents 7[i-EstradiolL-Type inGuineaVentricular Pig Myocytes Preface onekindofsteroidhormonewhosemain isestradiol Estrogen(E)is component hasaandtwo shows (E2)．Estradiolp types，andptype strongbiologicalactivity． valueinthetreatmentof Numerousstudiesshowthat has res