课件：酶促反应动力学.pptVIP

* 2.非竞争性抑制动力学特征 ①有I时，Vm随[I]增大而减少，但Km不变。 ②直线的斜率和纵轴截距随[I]增大而增大。 ③抑制程度随[I]增大而增大，与[S]无关。 ④增加[S]不能消除I对E的抑制。 3.非竞争性抑制的机制 非竞争抑制剂I不是结合在酶活性中心的底物结合位点上，而是结合到其他的必需基团（如催化基团）上。因此抑制剂并不降低E对S的亲和力，但却能阻止酶的催化作用，降低Vm。 （四）混合型抑制作用 Ks≠K’s，此不同于非竞争性抑制。 KiK’i时，属于非竞争性抑制与竞争性抑制之间的类型。 KiK’i时，属于非竞争性抑制与反竞争性抑制之间的类型。 KiK’i时，则(1+[I]/Ki) (1+[I]/K’i)，K’mKm，故直线交于横轴以下。 KiK’i时，则(1+[I]/Ki) (1+[I]/K’i)，K’mKm，故直线交于横轴以上。 2.动力学特点 ①当I存在时，Vm随[I]增大而减少；当KiK‘i时，Km随[I]增大而减少；当KiK’i时，Km随[I]增大而增大；在Vm和Km均减少时，Vm减少大于Km减少。故直线斜率增大。 ②抑制程度随[I]增大而增大。当KiK‘i时，抑制程度随[S]增大而增大；当KiK’i时，抑制程度随[S]增大而减少。 3.与上述三种抑制的关系 ①当K‘i→∞时，只有EI复合物，而无ESI复合物，属于竞争性抑制。 ②当Ki→∞时，只有ESI复合物，而无EI复合物，属于反竞争性抑制。 ③当Ki=K‘i时，E和ES与I以及E和EI与S结合的亲和力都相等，属于非竞争性抑制剂。 ④当Ki≠K‘i时，E和ES与I结合的亲和力以及E和EI与S结合的亲和力都相等，为混合型抑制。其中， KiK‘i为非竞争与反竞争性混合抑制； KiK’i为非竞争与竞争性混合抑制。 （五）其他类型的可逆抑制作用 1.部分抑制 2.底物抑制 3.产物抑制 三、不可逆抑制作用 概念：这类抑制剂与酶分子上的某些必需基团以牢固的共价键结合，使酶失活，不能用透析等物理方法除去抑制剂，而使酶复活。 特点：抑制程度比例于共价键形成的速度。 （一）专一性不可逆抑制作用 1.Ks型不可逆抑制剂：具有和底物类似的结构，还带有一个活泼的化学基团，能修饰酶分子中的必需基团。 2.Kcat型不可逆抑制剂：本身也是底物，还具有一种潜伏性的反应基团，这种基团可因酶的催化而暴露或活化，作用于酶的活性中心或辅基。 （二）非专一性不可逆抑制作用 与酶分子中一类或几类基团反应。 第三节 酶的作用机理 一、活性部位 1.活性部位：酶分子中能直接结合底物，并催化底物发生反应的部位。 2.结合位点：与底物直接结合，并负责酶的专一性。 3.催化位点：酶分子上直接催化底物发生反应的部位。 二、酶作用专一性机理 1.酶作用专一性：酶对底物和所催化的反应的选择性。 2.酶作用专一性机理 结合专一性（底物专一性）：取决于酶的活性中心（主要取决于结合位点）的空间结构。 催化专一性（反应专一性）：取决于酶催化位点的结构。 三、酶的高效催化机理 1.过渡态中间物和活化自由能 2.降低活化自由能的几个因素 ①邻近效应和定向效应 邻近效应：底物分子从稀溶液中密集到酶分子活性中心后，酶分子活性中心能使底物分子彼此靠近，大大提高了底物在活性中心部位的有效浓度，因而提高了反应速度。 定向效应：酶分子活性中心的催化基团与底物分子的反应基团之间能正确的定向排布，从而大大降低活化自由能，提高反应速度。 两种效应可以变分子间反应成分子内反应。 ②应变效应 酶与底物相结合时，底物使酶分子发生有利于催化的变化，同时酶也使底物分子发生了扭曲变形，使其几何和静电结构更接近过渡态。 ③酸碱催化 狭义酸碱催化： H+和OH-对反应物的催化作用。狭义酸碱催化剂是酸(H+)和碱(OH-)。 广义酸碱催化：广义酸碱催化剂是质子供体和质子受体。质子供体向反应物提供质子，质子受体从反应物接受质子，从而加速催化反应的作用。 ④共价催化 酶与底物以共价键结合成共价中间物，并迅速转变成活化能大大降低的过渡态，从而大大提高反应速度。 a.亲核催化 由亲核催化剂提供电子对，与反应物通过共价键结合成中间物的作用。 亲核催化剂：化合物中的未成键电子对或基团。 b.亲电子催化 由亲电子催化剂从底物分子中接受一对电子，并与该底物以共价键结合成不稳定的共价中间物的作用。 第四节 酶的调节机制 生理条件下酶的调节： ⑴酶活性的调节 ⑵酶浓度的调节 一、酶的别构效应和别构酶 （一）基本概念 别构效应(Allosteric Effect)：调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力的作用。 别构酶(Allosteric Enzyme) ：具有别构效应的酶。 调节物（效应物）：能使