课件：微生物发酵产酶.ppt

* 消泡剂：天然油脂类、聚醚、硅酮等 * * * * * Monod方程 1950年，法国的莫诺德(Monod)首先提出了表述微生物细胞生长的动力学方程，用以反映限制性基质浓度与细胞生长速率的关系： μm：为最大比生长速率 S： 限制性基质的浓度 KS ：莫诺德常数 μ 限制性基质浓度(S) 比生长速率(μ) KS * 当限制性基质的浓度SKs时，增加基质浓度可提高细胞比生长速率。 当限制性基质的浓度S=Ks时，细胞比生长速率达到最大比生长速率的一半。 当限制性基质的浓度SKs时，增加基质浓度就不能提高细胞比生长速率。 μ 限制性基质浓度(S) 比生长速率(μ) 此方程式与米式方程非常相似 KS * Monod方程的参数求解(双倒数法)： 将Monod方程取倒数可得： 或： * 通过测定不同限制性基质浓度下，微生物的比生长速率，就可以通过回归分析计算出Monod方程的两个参数Ks和μm 。 S/μ S ( y = ax + b ) 当x=0时，y=Ks/μm 当Y=0时， x=-b/a=-Ks Ks/μm Ks * 实例分析计算 1. 设定不同浓度的限制性基质浓度，培养细菌，得到相关细胞数量的试验数据 * 2. 选定对数生长期的几组数据，得到不同基质浓度与比生长速率的线性回归方程，求出对应的比生长速率。 细胞比生长速率: 对上式积分得：InX = μt + A0 (A0为积分常数，等于接种量的自然对数) 根据几组试验数据中的培养时间和细胞数量得到一线性回归方程，求出比生长速率 * 浓度1时的数据 浓度2时的数据 … … 根据各组试验数据中的培养时间和细胞数量得到一系列线性回归方程，求出对应的比生长速率。 * 3. 整理试验数据，求出Monod方程 S(mg/L) 6 33 64 153 μ(h-1) 0.06 0.24 0.43 0.66 原始数据 整理数据 S/μ(y) 100 137.5 192.5 231.8 S (x) 6 33 64 153 ( y = ax + b ) 通过第2步得到一个基质浓度（S）对应的一个比生长速率（μ） * μm ＝ 1.11 (h-1); Ks ＝ 97.6 mg/L 0 100 200 0 100 200 300 400 s S/μ Ks=97.6 Ks/um=108.4 * Ks和μm值随菌种、限制性基质种类的变化 微生物 限制生长基质 Ks μm（hr） 大肠杆菌 葡萄糖 0.22 -- 大肠杆菌 乳糖 0.58 -- 啤酒酵母 乳糖 2.6~3.0 0.18 啤酒酵母 葡萄糖 0.56 -- 纤维素分解菌 葡萄糖 0.86 0.125 固氮菌 葡萄糖 0.16~0.33 0.13 青霉菌 氧气 0.007 0.35 * Monod方程虽然表述简单，但不足以完整地说明复杂的生化反应过程，并且已发现它在某些情况与实验结果不符。 因此人们针对不同情况又提出了另外一些方程，但最终目的只有一个：就是利用建立起来的动力学方程来控制和优化发酵生产。 * 2.2 产酶动力学 产酶动力学主要研究细胞产酶速率以及各种环境因素对产酶速率的影响规律。 dE/dt：产酶速率 μ： 细胞比生长速率 X： 细胞浓度 α： 与细胞生长偶联的产酶系数 β ： 与细胞生长非偶联的产酶系数 * 不同的产酶模式所对应的产酶动力学方程形式也有所不同 主要分为三型： 生长偶联型 部分生长偶联型 非生长偶联型 * 产物的形成和菌体的生长相偶联 x p 同步合成型 α≠ 0、β= 0 * 产物的形成和菌体的生长相偶联 x p 中期合成型 α≠ 0、β= 0 产酶前期： 阻遏作用，不产酶 产酶后期： 产酶与生长相偶联 * 产物的形成和菌体的生长部分偶联 x p 延续合成型 α≠ 0、β ≠ 0 * 产物的形成和菌体的生长非偶联 x p 滞后合成型 α= 0、β ≠ 0 产酶前期： 阻遏作用，不产酶 产酶后期： 产酶与生长非偶联 * 本章内容 一、酶生物合成基本理论