课件：固定化酶和细胞.ppt

* 交联链孢霉菌细胞拆分DL-泛解酸内酯 交联 提高酶在有机底物体系中的稳定性 浙江鑫富 利用戊二醛交联固定化的链孢霉菌细胞(含内酯水解酶) 催化拆分DL- 泛解酸内酯，已实现D-泛酸钙和D-泛醇的大规模产业化年产量5000吨，占世界市场44% 5000L生物反应器 交联固定化菌体在反应 O O OH + 消旋化 DL-PL O O OH L-PL OH OH COOH D-PA O O OH D-PL 内酯化 D-泛解酸内酯 水解酶 浙江 鑫富药业 酶-化学耦联不对称合成左旋帕罗醇 原料利用率提高：底物近100%转化为目标产物，原子经济性大幅提高。 节能减排效果明显：有机溶剂用量减少约59.3%、“三废”排放减少约39.4%。 产品质量提高： ee 值大于99.5%（化学法99.0%）。 抗抑郁药帕罗西汀手性中间体左旋帕罗醇的合成 浙江 九洲药业 工程菌，酯酶；大孔树脂固定化酶；重复使用20次以上 （Industrial Engineering Chemistry Research (2010, 2008a, 2008b) 酵母展示脂肪酶在生物合成中的应用 脂肪酶 CALB/RML 酰基供体 油，脂肪酸、己酸等 酰基受体 甲醇，乙醇，糖醇等 反应体系 非水相/离子液等 产物及性质 芳香酯，表面活性剂，生物柴油等 应用 酵母展示脂肪酶在短链芳香酯合成的应用 无水体系中不同酸醇摩尔比对合成己酸乙酯的影响 无溶剂体系下酶催化合成芳香酯 酯 酸醇摩尔比 6h转化率 12h转化率 24h转化率 乙酸丁酯 乙酸异戊酯 乙酸叶醇酯 乙酸香叶酯 丁酸乙酯 丁酸异戊酯 丁酸叶醇酯 丁酸香叶酯 己酸乙酯 己酸丁酯 己酸己酯 己酸香叶酯 庚酸乙酯 辛酸乙酯 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 1：2 25.3% 22.0% 25.0% 9.5% 72.9% 70.1% 80.8% 19.0% 88.0% 56.3% 42.4% 18.8% 69.1% 24.1% 40.5% 40.1% 53.6% 38.1% 88.5% 90.4% 84.6% 76.9% 90.2% 88.9% 72.2% 60.2% 87.7% 55.0% 79.0% 85.9% 85.7% 85.7% 89.4% 92.3% 84.6% 90.5% 90.0% 90.6% 84.0% 90.6% 88.0% 87.9% 无水体系下合成芳香酯 酶传感器 酶传感器是由固定化酶与传感元件两部分组成的，其中酶是与适当的载体结合形成的不溶于水的固定化酶膜。 最常用的酶传感器是酶电极，即将固定化酶膜与转换电极做在一起，当酶膜与被测物发生催化反应而生成电极活性物质后，电极测定活性物质并将其转换为电信号输出。 酶电极 酶电极是由固定化酶与各种电极密切结合的传感装置。1962年Clark和Lyons提出模型，1967年Updike和Hicks首先制造出酶电极并把它用于葡萄糖的定量分析。 酶电极一般可根据电极检测物理量的不同分为电流型和电压型，前者一般有氧电极、H2O2电极等，后者有NH3、CO2、H2电极等。 较典型的一种酶电极为葡萄糖酶电极。 葡萄糖＋醌＋H2O 葡萄糖酸＋氢醌 葡萄糖氧化酶 氢醌 醌＋2H＋＋2e－ Pt 铂电极 葡萄糖酶电极 葡萄糖酶电极的敏感膜是葡萄糖氧化酶（GOD），它被固定在聚乙烯酰胺凝胶上。在酶膜的作用下葡萄糖发生氧化反应，消耗掉氧而生成葡萄糖酸和过氧化氢。通过用电极测量被消耗的氧或生成的过氧化氢就可了解葡萄糖浓度。 手掌型葡萄糖(glucose)分析仪 脲电极 Urea + 2H2O 2NH4++2HCO3- 脲酶 产生的2NH4+为阳离子电极感应。 此外还有： 氨基酸电极 醇电极 尿酸电极 乳酸电极 青霉素电极 亚硝酸离子电极：菠菜亚硝酸还原酶产生NH3 一些常见的酶电极 底 物 酶 电 极 5′－腺苷酸 5′－腺苷酸脱氨酶 NH4+ 乙醇，醇 乙醇脱氢酶 Pt 过氧化物 过氧化氢酶 Pt (O2) 磷酸葡萄 硫酸酯酶+葡萄糖氧化酶 Pt (O2) D-氨基酸 D－氨基酸氧化酶 NH4+ L-氨基酸 L－氨基酸氧化酶 NH3 蔗糖 蔗糖酶+葡萄糖氧化酶 Pt (H2O2) 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 Pt (O2) 硫酸酯 芳基硫酸酯酶 Pt 硫氰酸 硫氰酸酶 CN－ 硝酸盐 硝酸盐还原酶/ 亚硝酸盐还原酶 NH4+ 亚硝酸盐 亚硝酸盐还原酶 NH3（气体） 草酸 草酸脱羧酶 CO2（气体） 青霉素 青霉素酶 pH 乳酸 乳酸脱氢酶；细胞色素b Pt，Fe（CN）-4 L－氨基酸 脱羧酶 CO2 L－精氨酸 精