人乙型肝炎肝硬化组织7HIJ文库的构建及鉴定.PDFVIP

第 卷 第 期 浙 江 大 学 学 报 医 学 版 *$ ) , KD6*$ ID 年 ##( IDJOIJCDzyv2IVJIH JIVK2OTVNL )@2HVQJCTQV2IQ2T, ##( !B 0 0 0 0 G 8@@A CCC =DE:46F;= 9? 7: 39? 人乙型肝炎肝硬化组织7HIJ 文库的构建及鉴定 陈晓红 陈 智 陈 峰 朱海红 周红娟 姚航平 / / / / / 浙江大学医学院 附属第一医院传染病研究所 浙江 杭州 浙江大学医学院 基础医学部 浙江 杭州 )0 / *###*10 / *##*, 摘 要 目的 构建人乙型肝炎肝硬化组织 文库 为筛查与乙型肝炎肝硬化的发生特异相关的基因及探 K L ! 7HIJ / 讨乙型肝炎肝硬化的发病机制奠定基础 方法 用 方法提取人乙型肝炎肝硬化组织总 并用 纯 M ! NE5;D6 OIJ/ 3OIJ 化试剂盒进行 纯化 反转录合成单链 长距离 方法合成双链 产物经蛋白酶 水 1 / 1 3OIJ 7HIJ PQO 7HIJ PQO R 解 纯化后 用 酶切 将酶切产物进行分级分离 回收 以上的 组分 并与 载体连接 连 S / 1 / #0$ / 1 TU5V WX 7HIJ YNE5A62Z 接产物经体外蛋白包装 产生未扩增文库 鉴定文库的滴度和重组效率后 进行文库扩增 鉴定扩增文库的滴度和 / 1 / 1 重组效率 随机挑取 个噬菌斑 用载体克隆位点两端的通用引物进行 扩增 以检测所构建的 文库的 1 / PQO / 7HIJ 质量 结果 未扩增文库滴度为 ’ 重组效率为 扩增后文库滴度为 - 重组 M ! 0#*[# G / -+0$\ / 0*’[# G / AU 36 AU 36 效率为 用载体两端的通用引物进行 鉴定 插入片段平均