光合色素的提取与分离导学及典例分析.doc

周应章工作室　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　必修1教学参考 PAGE PAGE 1 “光合色素的提取与分离”疑点解析及典例分析 陈　钢（舟山中学 316000） 一、疑点解析 1．该实验对取材有什么要求？ 实验中要取新鲜的、绿色较深的叶片为实验材料，而不能取老叶或颜色浅的绿叶。因为新鲜的绿叶中色素的含量高且色素分子没有被破坏，使研磨匀浆中含有较多的色素，实验现象更明显。而老叶或颜色浅的叶片中叶绿素的含量低，使实验现象不明显。 2．实验中提取色素的是什么试剂？能用蒸馏水替代吗？ 提取色素的试剂通常选95%的乙醇，也可以用丙酮等其他有机溶剂，但不能用蒸馏水替代。因为叶绿素是脂溶性有机分子，根据相似相溶原理，它们只溶于有机溶剂，而不溶于水。 3．研磨时加入二氧化硅的作用是什么？ 叶绿体中的色素存在于叶绿体囊状结构的薄膜上，要使它们释放出来并溶解在酒精溶液中，至少需要破坏一层细胞膜和二层叶绿体膜，所以研磨必须充分。二氧化硅是白色粉末，硬度大且化学性质很稳定，不溶于水也不跟水反应，加入二氧化硅可以使研磨更加充分，破坏细胞膜和叶绿体膜，有利于叶绿体中的色素释放出来。 4．为什么研磨时要加入碳酸钙？ 叶绿素是一种含镁的化合物，其中的镁易被H+、Cu2+、Zn2+等离子取代，研磨后细胞液（含有机酸）流出，其中的氢可置换镁原子，使其成为褐色的去镁叶绿素。而碳酸钙是强碱弱酸盐，在水中溶解后呈现一种弱碱性，中和细胞液中的H+，以防止叶绿素被破坏。实验证明，不加碳酸钙研磨产生的色素提取液与相同条件下加碳酸钙研磨产生的色素提取液颜色相差无几，可见研磨过程中色素的损失并不大。但将提取液加塞后在暗处放置几小时，则前者变黄而后者无显著变化，证明碳酸钙确能防止色素的破坏。 5．画滤液细线为什么要画3～4次？ 为了使滤液细线上吸附更多的色素，分离后的色素带更清晰。 6．滤纸条为什么要剪角处理？ 由于液体表面张力的影响，层析液沿边缘扩散速度要大于里边扩散的速度，因此要将滤纸条的一端剪去两角，主要是为了延长边缘长度，这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，中间和两端的色素带在同一直线上。一般底边宽度接近滤纸条宽度的1/2时为最好。 7．分离时为什么滤液细线要高于层析液液面？ 层析液是一种有机溶剂，如果没及滤液细线，其中的色素就会溶解在层析液中，而几乎不随层析液在滤纸上扩散，影响层析效果。 8．为什么使用滤纸可以将层析液中的色素分离开？ 这种分离色素的方法叫纸层析法。滤纸上有无数小孔，所以在毛细拉力作用下，层析液能不断由下向上流动，流经色素滤液细线时，滤液细线上的色素就相继融入层析液。由于四种色素的化学组成和结构不同，因此每一种色素分子在层析液分子的作用下，克服色素分子之间的引力，向层析液中扩散的速度不同，即在层析液中的溶解度不同，因而四种色素随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同，其中胡萝卜素在层析液中的溶解度最高，扩散速度最快，其次是叶黄素、叶绿素a，叶绿素b溶解度最低，扩散得最慢。依据此原理使滤纸条上处于同一滤液细线上的四种色素随层析液在扩散中分离开来。 9．从上到下滤纸条上有几条色素带？分别呈什么颜色？ 滤纸条上共有四条色素带，从上到下依次为胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）。 二、典例分析 例1、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素层析，会得到近似同心的四个色素环，排在最里圈的色素是（ ） A．橙黄色 B．蓝绿色 C．黄色 D．黄绿色 解析：提取得到的四种色素中，黄绿色的叶绿素b在层析液中的溶解度最低，所以随层析液扩散的速度最慢，分布在最里圈。 答案：D 例2、若在实验中收集到的滤液绿色过浅，其原因可能是（ ） ①研磨时未加二氧化硅；②为了提取更多的色素，加入大量95%乙醇；③用丙酮液替代乙醇提取色素；④使用放置数天的菠菜叶。 A．①③④ B．①②④ C．②③④ D．①②③ 解析：研磨时未加二氧化硅将导致研磨不充分，很多叶绿体中的色素不能释放出来；加入大量无水乙醇后，将导致色素被稀释；叶绿素不稳定，菠菜叶放置数天后，很多叶绿素被分解；以上三种情况都会使提取液颜色变浅，而丙酮液和95%乙醇一样，都是有机溶剂，色素可以溶解在丙酮液，所以不影响实验结果。 答案：B 例3、某同学做“光合色素的提取与分离”实验，在下列操作中若有错误，请指出错误并更正。 ①将5克新鲜的菠菜叶片剪碎放研钵中，加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加2 mL蒸馏水，并迅速充分研磨；②在预备好的滤纸条上，距剪去两角的一边1cm处用钢笔画一条横线；③用毛细管吸取少量滤液，沿横线处均匀地划出一条滤液细线，紧接着重复划3～4