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HPV检测联合病理组织学对宫颈病变筛查的意义 郑锦利刘洁朱婵虹(福建医科大学附属闽东医院检验科355000) 【摘要】目的了解高危型人乳头瘤病毒(HPV)在不同年龄段和不同宫颈病变妇 女中的感染状况及基因型分布。方法 应用凯普导流杂交技术检测527例经病理 检查证实存在不同程度宫颈病变患者的21种HPV亚型，高危型13种，低危型5 种、中国人常见亚型3种。宫颈病变分为：慢性炎症、CIN1、CIN2、CIN3、宫颈 癌、尖锐湿疣六类。以10岁为一个年龄组进行分组比较各个年龄组的感染情况 及相应的病理分型结果。结果527例标木中，H P V感染438例，总感染率83.11% (438/527)检出了除43亚型以外的20种亚型。单一感染259例，二重感染120 例，三重感染46例，四重感染9例，五重感染2例，最多达六重感染(1例)。 高危型中：16 型 21.63%(口4/527)、58 型 11.0%(58/527)、52 型 6.45%(34/527) 居前三位;低危型以：□型2.84% (15/527)、6型2.66% (14/527)为主;中国 人常见亚型主要为：53 型 5.12% (27/527)、CP8304 型 3.98% (21/527)。结论 HPV 亚型的感染可发牛于各个年龄组，随着病变的加重高危型HPV的检出率也相应 增高，HPV基因分型检测联合病理学检查能有效地筛查宫颈病变情况，为防治宫 颈癌提供可靠的科学依据。 【关键词】人乳头瘤病毒(HPV)导流杂交宫颈病变基因型 宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤，宫颈癌与宫颈病变是一个多因素、多 步骤的过程。在诸多因素中高危型人乳头状瘤病毒(HPV)的持续感染是宫颈癌 发生的必要条件⑴目前已知的H PV有100余种亚型，其中30多种亚型可感染人 类牛殖道并引起宫颈病变⑵，HPV各亚型的分布存在地域性差异，其致癌性和后 果也不同［3］。木文旨在通过对福安地区不同年龄不同宫颈病变妇女HPV亚型感 染情况的检测，结合临床资料和病理组织学改变分析其意义。探讨不同亚型HPV 感染的致癌性，提高人群对宫颈癌防治知识的知晓率，也为木地区宫颈癌的防治 提供理论依据。 1、 资料与方法 1.1临床资料 以2009年12月?20□年6月在我院门诊及住院部就诊的 经病理组织学检查证实有宫颈病变的患者为研究对象。采样标准：有宫颈接触性 出血、宫颈息肉、宫颈糜烂、阴道分泌物异常的病人，共527例，年龄20?74岁， 平均年龄41.2岁。所有的标本均进行HPV检测。 1.2标本采集(1) HPV标本：行阴道镜检查后，暴露宫颈用H PV专 用的宫颈刷进行采样，获取标本后放置于专用的保存液中，置4度冰箱中--周之 内检测。(2)病理标本：常规阴道宫颈消毒,在阴道镜下对宫颈病变最严重处多 点活检,10 %福尔马林固定，送病理。 1.3主要仪器和试剂： 试剂：采用潮州凯普生物科技有限公司提供的HP V-D N A分型检测试剂 盒和提取试剂盒； 仪器：医用杂交分子快速杂交仪(潮州凯普生物科技有限公司)，PCR 扩增仪(杭州博日科技电子有限公司)。 1.4分型检测 DNA分型检测步骤:(1)提取：按照凯普基因提取试剂盒步骤进行 DNA分离提取o(2)PCR扩增：按照凯普基因扩增剂盒要求的条件进行扩增；(3) 杂交：根据凯普基因杂交试剂盒提供的说明书进行杂交前试剂准备、杂交前仪器 准备、PCR产物杂交、显色、结果分析等。 1.4.2结果判定：肉眼观察显色结果。阳性结果为清晰可见的蓝紫色圆 点。多个蓝紫色圆点为多重感染。 2、 统计学处理 采用SPSS 13.0统计软件进行数据处理。 3、 结果 H P V-D N A检测结果： 在527病例标本中检岀阳性病例438例(包 括双重或多重感染病例)，总阳性率为83.11% (438/527),在送检标本中检出了 除43亚型以外的所有20个亚型；高危亚型:16型21.63%(114/527)、58型11.0% (58/527 ) 52 型 6.45% (34/527)居前三位;低危型以口型 2.85% (15/527 ) 6 型2.66% (14/527)为主；中国人常见亚型主要为:53型5.12% (27/527) C P8304 型 3.98% (21/527)见表 10 表1 527例标本中检出的主要感染的HPV亚型结果 3.2在527例阳性样本中”单一亚型感染率为49.15% (259/527),双重亚 型感染率为22.77% (120 /527)，三重亚型感染率为8.72% (46/52刀，四重亚型感染 率为1.7%(9/527)五重亚型感染率为0.37%(2/527),最多的一个样本达六重感染, 为一个48岁妇女。详见表2。 表2不同宫颈病变患者的HPV感