JC病毒大T抗原及p53蛋白在胃癌中的表达及意义.docxVIP

JC病毒大T抗原及p53蛋白在胃癌中的表达及意义 马彬(兴城市人民医院病理科辽宁兴城125100) 【摘要】目的 探讨 JC 病毒(JC virus, JCV)大 T 抗原(large tumor antigen,T-Ag) p53蛋白的表达与胃癌发生发展的关系。方法 应用免疫组化PV-9000法检测49 例胃癌和20例正常胃黏膜组织中JCVT-Ag、p53蛋白的表达。结果正常胃粘 膜组织JCVT-Ag、p53蛋白无表达;49例胃癌组织中JCVT-Ag阳性表达率为 30.6% (15/49)o胃癌组织中JCV T-Ag阳性表达与分化程度、浸润深度及淋巴结 转移间无统计学意义(Pgt;0.05)°49例胃癌组织中p53蛋白阳性表达率为73.5% (36/49)o胃癌组织中p53蛋白阳性表达与分化程度、浸润深度、淋巴结转移间差 异具有统计学意义(Plt;O?05) o结论JCVT-Ag与p53蛋白在胃癌的发生、发 展中可能起重要作用。 【关键词】胃癌JC病毒 大T抗原p53蛋白 免疫组织化学 胃癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤之一，在世界范围内其发病率和死 亡率居各种恶性肿瘤第2位⑴。大量研究表明，胃癌的发生、发展是多基因、 多步骤的复杂过程。近年来随着对人类基因组功能研究的不断深入，以及各种新 的分子牛物学技术的出现，牛物性致癌因子尤其是病毒性致癌因子在人类肿瘤发 牛与发展过程中的作用己越来越受到关注和重视。最近多个实验室研究证实，JCV 与人类多种肿瘤如直肠癌、胃癌、食管癌、肺癌、前列腺癌、脑肿瘤有关［2,6］。 木实验应用免疫组化PV-9000法检测49例胃癌组织中JCV T-Ag和p53蛋白的表 达，分析它们与胃癌发生、发展的关系。 1材料与方法 1.1临床资料 收集兴城市人民医院病理科2008年1月?2010年I月连 续性石蜡标木。所有标木均经10%甲醛固定，石蜡包埋，4mu;m厚度切片，行 HE染色及免疫组织化学检测。所有病例均由两位以上病理医师确诊。胃癌组织 标木49例，其中，男35例，女14例。年龄25—73(平均48)岁。所有患者术 前均未行放疗和化疗。随机抽取非肿瘤胃粘膜组织20例(胃炎患者内窥镜活组 织检查)作为正常对照。对全部胃癌组织石蜡包埋标本按WHO肿瘤分类标准(胃 癌)进行组织学分型，以UICC2002年制定的最新的TNM分期系统进行TNM分 期。高+中分化腺癌22例，低分化27例；浸润黏膜及黏膜下层9例。侵及肌层 者16例，侵及浆膜层及浆膜外者24例；有淋巴结转移36例，无淋巴结转移13 例。 1.2试剂 鼠抗人单克隆抗体JCVT?Ag购自美国Calbiochem公司， p53、柠檬酸抗原修复液、PV-9000免疫组化试剂盒均购自北京中杉金桥生物技 术有限公司。 1.3免疫组化PV-9000法操作严格按照试剂盒说明进行。石蜡切片经 脱蜡和梯度洒精水化，抗原修复，室温下3%过氧化物酶孵育切片；PBS冲洗, 其余染色步骤按说明。苏木素轻度复染。二甲苯透明，中性树胶封片，光镜观察。 1.4结果判断JCVT?Ag、p53蛋白均以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性 (图1)、(图2)。根据抗体在切片中阳性反应细胞的比例分为:阳性细胞数lt;10% 或完全消失的标记为(-),阳性细胞数10%?90%标记为(+)；阳性细胞数 gt;9o%标记为(++),阳性细胞数的计算标准：观察500个肿瘤细胞。阳性细 胞数/ 500times;100%来计算。常规设阳性、阴性对照，以已知阳性组织作为 阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。 1.3统计学处理用SPSS17.0统计软件包处理。统计各组间差别及相关 性分别用x 2检验,Spearman相关分析法。 2结果 2.1JCVT-Ag阳性表达在细胞核，JCVT-Ag在正常胃黏膜组织中无阳性 表达,在49例胃癌组织中15例(30.6%)阳性表达(Plt;O. 05)o p53蛋白阳性 表达在细胞核，在正常胃黏膜组织中无表达，在49例胃癌组织中36例(73.5%) 阳性表达(Plt;0?05)。经统计学分析得出，正常胃黏膜组与胃癌组之间差异有显 著性(Plt;0.05)o 2.2 JCVT-Ag p53蛋白表达与胃癌病理参数的关系 见表 表1 JCVT-Ag与p53蛋白表达与胃癌病理参数之间的关系［n(%)］ 2.3 JCV T-Ag与p53蛋白间的关系 49例胃癌组织中JCVT-Ag阳性表达(+)15例中，p53蛋白阳性表达(+)14 例；而JCVT-Ag阴性表达(-)34例中,p53蛋白阴性表达(?)12例,结果分析显 示JCVT-Ag阳性表达(+)与p53蛋白阳性表达(+)强度间呈正相关(Plt;0.05,见表 2)。 表2JCV T-Ag与p53蛋白表达的相关性 3讨论 JC