谷氨酸氧化酶高产菌株的筛选鉴定及催化生产α酮戊二酸-生物加工过程.PDFVIP

第 １５卷第３期 生　 物　 加　 工　 过　 程 Ｖｏｌ１５ Ｎｏ３ ２０１７年５月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｍａｙ ２０１７ － ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊｉｓｓｎ１６７２ ３６７８２０１７０３００４ 谷氨酸氧化酶高产菌株的筛选鉴定及催化生产 α 酮戊二酸 １ ２ １ １ １ 刘　 佳 ，徐继嗣 ，罗秋玲 ，陈修来 ，刘立明 （１ 江南大学 食品科学与技术国家重点实验室 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 ２１４１２２； ２ 张家港市华天制药有限公司，江苏 张家港 ２１５６３３） 摘　 要：采用简易的偶联终点显色反应（Ｔｒｉｎｄｅｒ显色反应），从土壤中分离出高产谷氨酸氧化酶（ＬＧＯＸ）的菌株不 透明红球菌Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｏｐａｃｕｓ ＦＭＭＥ１ ４１，并对此菌株的产酶特性进行研究。 结果表明：该菌株所产ＬＧＯＸ 主要 ２＋ 分泌在发酵液中，对Ｌ 谷氨酸具有较强的底物专一性，最适ｐＨ ６５，最适温度为３５ ℃，Ｍｎ 是该酶的激活剂。 通 过发酵培养基优化，培养３０ ｈ 时ＬＧＯＸ活力达到６４ Ｕ／ ｍＬ。 利用该酶转化Ｌ 谷氨酸生产α 酮戊二酸，在最佳转 化条件下转化２０ ｈ，α 酮戊二酸产量达到９１２ ｇ／ Ｌ，转化率为９１８％，α ＫＧ生产强度为４５６ ｇ／ （Ｌ·ｈ）。 关键词：Ｌ 谷氨酸氧化酶；不透明红球菌；α 酮戊二酸；酶法转化 － － － 中图分类号：Ｑ９３９９７　 　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２ ３６７８（２０１７）０３ ００１８ ０７ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｉｇｈ ｙｉｅｌｄ ｓｔｒａｉｎ ｏｆ ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｏｘｉｄａｓｅ ａｎｄ ｉｔｓ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ α⁃ｋｅｔｏｇｌｕｔａｒａｔｅ １ ２ １ １ １ ＬＩＵＪｉａ ，ＸＵＪｉｓｉ ，ＬＵＯ Ｑｉｕｌｉｎｇ ，ＣＨＥＮ Ｘｉｕｌａｉ ，ＬＩＵ Ｌｉｍｉｎｇ （１Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ， Ｊｉａｎｇｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｘｉ ２１４１２２，Ｃｈｉｎａ；２Ｈｕａｔｉａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ．，Ｚｈａｎｇｊｉａｇａｎｇ ２１５６３３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇ ａ ｓｉｍｐｌｅ Ｔｒｉｎｄｅｒ ｃｏｌｏｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｙｉｅｌｄ ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｏｘｉｄａｓｅ （ＬＧＯＸ） ｓｔｒａｉｎ Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｏｐａｃｕｓ ＦＭＭＥ １⁃４１ｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｓｏｉｌ．ＴｈｅｅｎｚｙｍａｔｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆＲ． ｏｐａｃｕｓ ＦＭＭＥ １⁃４１ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．ＬＧＯＸ