叶绿体色素提取、分离及理化性质.ppt

实验五  叶绿体色素的提取、分离及其理化性质  一、目的与要求 掌握叶绿素的分离、提取方法； 了解叶绿体色素的种类、性质和功能； 二、实 验 原 理 叶绿体色素？ 叶绿体色素分离原理？ 叶绿体色素性质？ （一）叶绿体色素： 叶绿素 类胡萝卜素 叶绿素a 叶绿素b 胡萝卜素 叶黄素 3:1 (阳生) ２:1 (阴生) 2：1 3：1 叶绿体在细胞中的分布与结构 类囊体膜的结构及功能 类胡萝卜素的结构式 （二）叶绿体色素分离原理？ 色素分离的方法有多种，纸层析是最简便的一种。当溶剂（有机推动剂）不断从纸上流过时，由于混合物（叶绿素提取液）中各种成分在固定相（滤纸纤维素所吸附的水分）和流动相（有机推动剂）间具有不同的分配系数，所以移动速度不同，经过一定时间后，可将各种色素分开 （三）叶绿体色素性质？ 物理性质：不溶于水，易溶于有机溶剂 化学性质：皂化反应，置换反应 功能：吸收光能、电子传递、光能转化（少量叶绿素a） 叶绿素的吸收光谱 叶绿素的吸收光谱 叶绿素的荧光现象 置换反应 皂化反应:  Chla、Chlb 是双羧酸的酯可发生皂化反应 一个羧基被甲基酯化 另一个羧基被叶醇基酯化 COOCH3 COOK C32H30ON4Mg +2KOH C32H30ON4Mg COOC20H39 COOK 叶绿酸盐 + CH3OH + C20H39OH 甲醇 叶绿醇  新鲜的植物叶片。 80%乙醇、CaCO3、醋酸铜结晶、无水硫酸钠、1N盐酸。 量筒，新华滤纸，大试管一支，长滴管，剪刀。 三、材料与试剂 四、操作步骤 提取 ： 称取1g左右的鲜叶 研磨 过滤 色素提取液　 层析： 四、操作步骤 研磨提取叶绿素（80%乙醇） ↓过滤、洗研钵及残渣 ↓ ↓ 2mL乙醇提取液 余下的色素提取液 ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ 加入1N HCl 纸层析 荧光 皂化反应 光破坏 （脱镁叶绿素） ↓ ↓ 分离色素 Cu取代 ↓ 扫描光谱 荧光 酮取代反应 四. 结果与分析 对实验现象作好详细记录， 并加以解释 请对皂化反应现象做出合理解释，而不是单单用反应方程式来表示