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第二十章 脑脊液标本的细菌学检验 概述 正常人体脑脊液是无菌的 细菌性脑膜炎属于临床医学急症 引起脑脊液感染的常见菌有 革兰阴性菌 革兰阳性菌 引起脑脊液感染的常见菌 革兰阴性菌 脑膜炎奈瑟菌 卡他布兰汉菌 流感嗜血杆菌 肠杆菌科 非发酵菌 类杆菌属 多杀巴斯德菌 引起脑脊液感染的常见菌 革兰阳性菌(1) 金黄色葡萄球菌 凝固酶阴性葡萄球菌 肺炎链球菌 B群链球菌 A群链球菌 肠球菌属 消化链球菌 引起脑脊液感染的常见菌 革兰阳性菌(2) 结核分枝杆菌 产单核李斯特菌 炭疽芽胞杆菌 产气荚膜梭菌 引起脑脊液感染的常见菌 革兰阳性菌(3) 新型隐球菌 标本的采集和运送 标本采集指征 发热 头痛 恶心 呕吐 颈项强直和反射增强 标本的采集和运送 采集方法 经腰椎穿刺获得 从Ommaya管采集 标本的采集和运送 标本的运送 采集标本后在常温下立即送检 不可置冰箱冷藏或低温保存 标本的验收、培养、分离和鉴定 标本的验收 培养瓶是否有渗漏、破损或明显污染 培养瓶上是否有标签 培养瓶上的标签与申请单是否相符 脑脊液是否足量，并在申请单上注明标本量 革兰染色 标本的验收、培养、分离和鉴定 标本的显微镜检查（2） 抗酸染色 4000rpm离心30min，沉淀物涂片抗酸染色或金胺“O”染色 抗酸染色 标本的验收、培养、分离和鉴定 标本的显微镜检查（3） 墨汁染色 3000rpm离心10~15min，沉淀物涂片墨汁染色 墨汁染色 标本的验收、培养、分离和鉴定 标本的培养、分离和鉴定（1） 需氧培养 血琼脂、巧克力琼脂、麦康凯或EMB、营养肉汤 5~10%CO2孵育 标本的验收、培养、分离和鉴定 标本的培养、分离和鉴定（2） 厌氧培养 血琼脂、PEA或CAN、厌氧肉汤 厌氧气体孵育 标本的验收、培养、分离和鉴定 标本的培养、分离和鉴定（3） 真菌培养 沙保弱葡萄糖琼脂 30oC孵育 标本的验收、培养、分离和鉴定 标本的培养、分离和鉴定（4） 选取平板上生长的菌落作革兰染色，根据染色结果作细菌的初步分群 根据初步分群的结果进行种的鉴定 标本的验收、培养、分离和鉴定 标本的培养、分离和鉴定（5） 也可根据革兰染色结果直接将分离株种入各种商业鉴定板进行鉴定 报告及解释 阳性结果报告 初级报告 涂片或培养阳性应立即电话报告 最终报告 报告细菌种属名 报告标准抗生素敏感试验结果 报告及解释 阴性结果报告 普通培养两天 48h培养未见细菌生长 疑特殊致病菌感染时，需延长培养时间 * 脑膜炎奈瑟菌 结核分枝杆菌 新型隐球菌 假丝酵母菌属 * 脑膜炎奈瑟菌 结核分枝杆菌 新型隐球菌 * *
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