尿碘测定检测方法及注意事项.ppt

尿碘检测方法及注意事项 ;主要内容;检测方法;原理：;仪器设备 1、分光光度计 2、恒温水浴箱 3、消化控温加热装置（电热恒温干燥箱） 4、10ml比色管（玻璃试管） 5、石英钟;试剂 1、过硫酸铵溶液 c=1.0mol/L 2、硫酸溶液 c=2.5mol/L 3、亚砷酸溶液 c=0.1mol/L 4、硫酸铈溶液 c=0.076mol/L 5、碘标准使用溶液 1ml含碘10μg ;方法 1、分别取0.2ml碘标准使用系列溶液及尿样（取样前需摇匀尿液，使所有沉淀物混悬；如果尿样的碘浓度超过标准曲线的碘浓度范围，则作适当稀释后取样）各置于玻璃试管中，各管加入1ml过硫酸铵溶液，混匀后置于控温100℃的消化控温加热装置中，消化60min，取下冷却至室温。以下分析步骤2-4，可在20℃-35℃之间一个稳定的温度环境下（室温或控温）进行，要求温度波动不超过0.3℃。 ;2.各管加入2.5ml亚砷酸溶液，充分混匀后放置15min，使其温度达到平衡；注意将标准系列管按碘浓度由高至低顺序排列。 3.秒表计时，依顺序每管间隔相同时间（30s）向各管准确加入0.30ml硫酸铈铵溶液，立即混匀。 ;4.待第一管（即标准系列中加300μg/L碘浓度管）的吸光度值达到0.15-0.20之间时，依顺序每管间隔同样时间（30s）于波长420nm波长下，用1cm比色杯，以水作参比，测定各管的吸光度值。 5.标准曲线绘制：以碘标准使用系列溶液的碘浓度为横坐标和吸光度值为对数纵坐标，在半对数坐标系中绘制标准曲线。 ;结果计算 回归方程法 标准曲线的碘浓度C（ μg/L）与吸光度值A的回归方程为C=a+b ㏑A（或lgA），计算标准曲线的回归方程，将样品管的吸光度值代入此方程，求出所测样品中碘浓度，再计算尿中碘浓度。 ;注意事项;实验室环境：由于碘离子的易氧化性和碘分子的易挥发性，容量滴定分析用的碘标准溶液、固体碘、碘酒、碘盐检测场所、上述这些含大量碘的废液的倒弃水槽等都是实验室环境中碘污染的主要来源。 ;建议采用专用实验室操作。 条件实在不够的情况，必须与碘盐实验室分开且室内不能存放含碘的其他试剂和样品； 必须在远离可能含碘离子的上述这些场所进行试验操作。保证实验室清洁干净，无碘的污染。 操作前实验台面需用1%硫代硫酸钠溶液进行擦拭。 ;注意事项;尿样消化无特异性终点指示，每批样品消化温度、时间很难一致。每批样品测定必须同时设置标准曲线，以保准样品、标系测定条件的一致性。标准曲线浓度最好做双平行。 大批样品测定需用两台水浴箱、两台分光光度计测定时，需要分别设置一套空白及标系。因两台仪器很难掌握条件一致。;使用控温烤箱消解，但不可开吹风功能选择同样规格的硬质玻璃管15mm×20mm。 ;宜采用数字型直读分光光度计测定，有利于准确读取吸光度值。读数要准确、稳定快速。若用指针型分光光度计，吸光度大于1.0时读数误差大。 ;消化后的冷却，放置室温冷却，不能用冷水急冷。使其充分放出消化产生的氯气、氧气 加亚砷酸溶液后的恒温时间按标准规定进行。催化砷铈反应的碘只是碘离子，碘酸根离子（IO3-）没有催化能力，只有将碘酸根离子转变成碘离子(I-)才能催化砷铈反应。 15分钟时间除使充分反应，体系温度达平衡外，还使碘酸根充分与亚砷酸，变成碘离子(I-)。放置时间不宜过长，避免碘离子(I-)被空气氧化成碘分子而挥发损失。 ;砷铈反应整个环节都在恒温水浴中进行 硫酸铈加入前要先水浴恒温，以达到温度一致 用加样枪加入，要求动作快速。 吸取时要注意防止产生气泡，以免影响加入量。同时最好用干净滤纸擦干吸头外壁，加样时尽量不要靠试管壁。 硫酸铈溶液在做样品前先试用量，保证吸光度在0.15-1.0之间。;控制要点;尿碘测定中反应温度、反应时间控制与测定误差——操作中反应温度波动及反应时间偏离对测定结果的影响;22; 当按照尿碘测定方法操作结果出现工作曲线碘空白管的吸光值很小时（例如30℃条件下砷铈反应30min时碘空白管的测定吸光度＜0.7）： 先检查光度计波长是否准确； 是否使用了已风化或潮解的过硫酸铵固体试剂； ;是否配制得的Ce4+溶液浓度偏低； 再检查检测体系是否存在碘污染，并予以消除。这里的检测体系包括：所用试剂、水、所用器皿、实验室环境； 国家冻干尿碘标准物进行检测质量控制。 ;采样要求; 样品的采集与保存 采样后应尽快送实验室检测，不能尽快检测可放4℃冰箱保存。 有文献报道尿样放冰箱(4 ℃)可保存 2 个月；如果长时间内不能检测则应该冷冻保存(- 20 ℃）。; 无碘水制备： 1L蒸馏水中加碳酸钠0.25g和高锰酸钾0.10g，进行蒸馏。;成套