蛋白表达载体常用标签综述.pdfVIP

蛋白表达载体系统 重组蛋白表达技术和重组蛋白表达载体现已广泛应用于生物学各个具体领域, 尤其是体内功能研究和蛋白质的大规模生产。 GeneCopoeia 的蛋白表达载体按照表达宿主的不同分为3 类:B 类，M 类和Lv 类。B 类的表达宿主为大肠杆菌，M 类的宿主为哺乳动物细胞，Lv 类是慢病毒载 体，宿主可以为哺乳动物细胞或原代细胞。 除了必要的复制和筛选的元件，协助表达和翻译的元件外，本文将各类载体按 荧光蛋白标签、多功能标签、促溶解度标签和抗体免疫共沉淀标签四种，先将几 种主流的标签功能初步介绍如下： eGFP/eCFP/eYFP/mCherry 分别是增强型绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/增强型黄色荧光蛋白/单 体红色荧光蛋白标签,具有不同的激发波长和发射波长，均由野生型荧光蛋白通 过氨基酸突变和密码子优化而来。就eGFP 而言，相对于GFP，其荧光强度更强、 荧光性质更稳定。同时载体中构建的Kozak 序列使得含有eGFP 的融合蛋白在真 核表达系统中表达效率更高。mCherry 是从DsRed 演化来的性能最好的一个单体 红色荧光蛋白，可以和GFP 系列荧光蛋白共用，实现多色标记体内、外实验表明， mCherry 在N 端和C 端融合外源蛋白时，荧光蛋白活性和被