大肠杆菌菌浓的测定及发酵罐实验的了解.pptVIP

实 验 六 大肠杆菌菌浓的测定 及发酵罐实验的了解 目的要求 学习比浊法测量细菌数量的方法； 学习空气浴摇床的使用方法； 学习分光光度计和离心机的使用方法； 掌握菌浓和菌体干重关系曲线的测定方法； 了解通用发酵罐的基本结构。 了解发酵罐实验的一般流程及注意事项。 微生物生长曲线的测定 比浊法 干重法 菌落计数法 血球计数板计数法 … 菌浓OD600与菌干重的对应关系 将大肠杆菌用LB培养基进行培养，在快速生长中期取样，分别用去离子水（新鲜LB培养基）稀释至不同浓度，分别测定OD600值。同时取10mL菌液，8000rpm离心5min后，弃菌液，并用无菌水重悬洗涤、离心2次， 80℃下烘干至恒重后，测得干重。 菌浓与OD600的对应关系如下图所示。 经数据拟合，线性良好。 大肠杆菌菌浓OD600与菌干重的关系曲线 编号 样品浓度（g/L） OD600 离心管空重（g） 离心管+菌 重量（g） 实验材料 菌种： 大肠杆菌。（老师提前准备菌种和用于菌体干重测定的菌液） 仪器和其它物品： 722型分光光度计，空气浴振荡摇床，离心机，比色皿，试管，移液器、枪头、离心管等。 上次灭菌的肉膏蛋白胨液体培养基。 发酵罐 发酵培养基 发酵菌种 火圈… 实验内容分配 每4人一组 每组建立一个菌浓和OD600关系曲线。 分光光度计的实验 空白对照 吸光度和