液相层析萤光侦测器法(NIEAR608.11B).docVIP

PAGE  第 PAGE 1頁，共 NUMPAGES 13頁 事業廢棄物萃出液中胺基甲酸鹽農藥檢測方法－液相層析／螢光偵測器法 中華民國89年2月14日（89）環署檢字第0007931號公告 自中華民國89年5月14日起實施 NIEA R608.10B 中華民國91年3月5日環署檢字第0910014627號公告修正,原方法名稱為「事業廢棄物溶出液中胺基甲酸鹽農藥檢測方法－液相層析／螢光偵測器法」,新編碼為NIEA R608.11B 一、方法概要 事業廢棄物溶出液經過濾後，取適當體積直接注入高效能液相層析儀，使用逆相層析管柱及梯度沖提法分離出各種胺基甲酸鹽殺蟲劑及代謝物，在95℃下經氫氧化鈉溶液水解生成甲基胺，甲基胺再與鄰苯二甲醛（o-phthalaldehyde，簡稱OPA）及2-氫硫乙醇（2-mercaptoethanol）反應，生成具強螢光性之衍生物，最後再以螢光偵測器在418 nm之波長測其螢光強度，以求得溶出液中各種胺基甲酸鹽農藥之濃度。 二、適用範圍 本方法適用於事業廢棄物溶出液中納乃得（Methomyl）、安丹（Propoxur）、加保扶（包括Carbofuran與其代謝物3-hydroxycarbofuran）、滅必蝨（MIPC）、丁基滅必蝨（BPMC）、加保利（Carbaryl）、得滅克（包括Aldicarb與其代謝物Aldicarb sulfoxide、Aldicarb sulfone）、滅賜克（Methiocarb）及歐殺滅（Oxamyl）等十二種胺基甲酸鹽農藥之檢測。 三、干擾 （一）本方法之干擾可能來自溶劑、試劑、玻璃器皿及其他處理過程所接觸器具之污染。這些干擾會導致液相層析圖基線之上移。因此，必須進行系統空白試驗，以證實在此分析條件下，所有的物質及器具均未受污染。 （二）玻璃器皿必須徹底地清洗以避免干擾。使用後之玻璃器皿應儘快以最終使用之溶劑潤溼，接著用熱水泡清潔劑清洗，然後用自來水和試劑水淋洗，玻璃器皿晾乾後，再以450℃加熱1小時(注意：量瓶不可加熱)。有些熱穩定性的物質可能無法以前述加熱方式去除，此時可用丙酮徹底淋洗玻璃器皿以取代加熱法。玻璃器皿乾燥及冷卻後，密封其開口並放置於乾淨的環境中。儲存時應將玻璃器皿倒置或用鋁箔紙覆蓋於其上，以防止灰塵或其他污染物的累積。 （三）使用高純度的試劑及溶劑可將干擾程度減至最小，必要時應使用全玻璃製之蒸餾系統將溶劑純化。 （四）使用高效能液相層析儀分析高濃度樣品後，緊接著分析另一低濃度樣品時，可能會造成干擾。因此，於前後樣品分析之間應以甲醇清洗注射針頭。必要時可分析高濃度樣品後注射一針或數針甲醇，以證實針頭未殘留污染物 。 （五）必要時應使用質譜儀或不同靜相的層析管對分析結果予以再確認。 四、設備 （一）樣品瓶：棕色廣口硼矽玻璃材質，容積為500及100 mL，附螺旋蓋，其內襯為鐵氟龍墊片。 （二）注射器：容積為500 ?L之注射針筒或自動注射器。 （三）量瓶：棕色硼矽玻璃材質，容積為10、25、50、100及1,000 mL 。 （四）天平：可精稱至0.1 mg。 （五）pH計。 （六）水樣過濾裝置：容積1或5 mL之玻璃注射筒，使用直徑13 mm且孔徑為0.2 ?m之濾片。 （七）移動相與OPA反應溶液過濾裝置：使用直徑47 mm且孔徑為0.45 ?m之濾片。 （八）氦氣或氮氣：純度99.99 %。 （九）排煙櫃。 （十）毒性特性溶出設備：參閱「事業廢棄物毒性特性溶出程序」（NIEA R201.10）之四設備。 （十一）高效能液相層析儀：包含移動相泵、附管柱後衍生反應器、螢光偵測器及層析管，儀器操作條件詳列如下（本操作條件僅供參考，操作者可依實際需要調整之）： 1、層析條件 層析管柱：4.6 mm×150 mm，C-18，5 ?m之Pickering管柱或其他性質相當者 溶劑A：試劑水 溶劑B：HPLC甲醇 流速：1.0 mL/min 層析溫度：45℃ 注射體積：200 ?L 溶劑梯度程式設定： 甲 醇 甲 醇 甲 醇 甲 醇 甲 醇 甲 醇 動 相 0％（試劑水100％） 0 → 20 ％ 20 → 25 ％ 25 → 70 ％ 70 → 0 ％ 0％（試劑水100％） 時間變化 0 → 1 min 1 → 3 min 3 → 8 min 8 → 35 min 35 → 36 min 36 → 45 min 2、管柱後水解條件 溶液：0.05 N氫氧化鈉溶液 流速：0.3 mL/min 溫度：95℃ 3、管柱後衍生反應條件 溶液：OPA反應溶液 流速：0.3 mL/min 4、螢光偵測器條件 偵測槽：3.5 ?L 激發波長：230 nm 發射波長：418 nm 五、試劑 （一）試劑水。 （二）甲醇：HPLC級，使用前通入氮氣除氣。 （三