孕妇艾滋病、梅毒与乙肝检测技术应用.ppt

梅毒螺旋体抗原血清试验 采用梅毒螺旋体作抗原，为特异性抗原，检测血清中抗梅毒螺旋体IgG或IgM抗体。 敏感性和特异性均较高。一期梅毒的敏感性为70％～100％，二期梅毒达100％，三期梅毒95％～98％，特异性94％～100％。 产时HIV抗体检测流程 中国预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播HIV检测流程 (1)酶联免疫吸附试验（ELISA） HIV抗体检测试剂：检测HIV-1/2抗体 HIV抗原抗体联合检测试剂：可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体 用酶标仪测定结果 ELISA酶联免疫吸附实验 ELISA HIV 抗原包被平板 病人抗体 酶 显色剂 + ve - ve 阴性对照 阳性对照 阴性 阳性 质控 酶联免疫吸附试验（ELISA） 优点：准确性高、价格低廉、判断结果标准客观、结果便于记录和保存 用途：流行病学监测及临床大量标本的检测 样本分析 (2)化学发光或免疫荧光试验 采用发光或荧光底物 既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体 酶或荧光标记的HIV抗原或抗体，加发光或荧光底物 用发光仪或荧光仪测定结果 HIV检测：病毒核酸检测 这些检测 检测HIV感染者血液或血浆中的病毒 必须由经过专门培训的实验室人员操作 实验室需有资质，并配备专门设备 昂贵，不是针对所有人进行的常规检测方法 PCR（多聚酶连反应法）检测 HIV DNA定性检测血液中是否含有病毒，用于诊断 18月龄内婴儿是否感染HIV HIV RNA定量检测病毒载量，即血浆中的病毒数量， 用于监测对抗病毒治疗的反应。 * 全血样品 加50ul样品于样品垫中 手指血方法 静脉血方法 加一滴缓冲液 15分钟内读取结果 （3）快速检测（RT）及其它检测试验 样　　品 初筛试验 一阴一阳 均阳性反应 报告阴性 确证试验 复检试验 报告阴性 均阴性反应 阳性反应 原有试剂＋另一 不同原理（或厂家） 试剂或另外两种不同 原理（或厂家）试剂 选用筛查试剂 阴性反应 HIV抗体筛查检测流程图 HIV抗体确证试验 确证试验的试剂： 必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂。 确证样品： 可采用血清、血浆、滤纸干血斑 确证试验方法： 免疫印迹试验(WB)、条带免疫试验(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉淀试验(RIPA)及免疫荧光试验(IFA)。国内常用的确证试验方法是WB。 HIV抗体确证实验结果 a 强阳性对照（HIV-1和HIV-2） b弱阳性对照（HIV-1） c阴性对照 d典型的HIV-2血清阳性反应 a b c d gp160 gp120 p66 p55 p51 gp41 p39 p31 P24 p17 血清对照 HIV-2特异带 初筛检测阳性标本 两种筛查试剂 报告阴性 阴性反应 一阴一阳 阳性反应 确证试剂 复检试验 根据具体情况进一步 检测HIV-2 报告阴性 出现HIV-2指示条带 阴性反应 不确定反应 报告HIV-1 阳性 HIV-1 阳性反应 结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带型没有进展或呈阴性反应， 则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进展， 但不满足阳性标准，应继续随访到8周。如带型没有进展或呈阴性反应则报告 阴性；满足HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准可视情况 决定是否继续随访。 HIV抗体确证检测流程图 HIV抗体 母亲 HIV 抗体经胎盘进入胎儿，出生时新生儿和婴儿早期抗体阳性，不一定是感染 出生时母亲的抗体，80~90% 在生后 9~12 个月消失，出生后 18 个月基本上全部消失 18 个月后儿童 HIV抗体仍然阳性，视为自身感染产生的抗体 18个月以下婴幼儿的HIV诊断 婴幼儿HIV感染的抗体检测 适用于： HIV感染产妇所生婴幼儿； 母亲HIV感染状态不详，儿童出现HIV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。 婴儿12个月时进行HIV抗体检测 阴性排除感染，纳入正常儿童保健； 阳性者继续追踪随访，至18个月再次进行HIV抗体检测，结果阴性排除感染。 18个月以下婴幼儿的HIV诊断 HIV 病毒载量（HIV RNA） 用来监测已知的HIV 感染病人的病毒载量试验； 真阳性的结果通常 100,000 拷贝/毫升, 而假阳性结果 1,000拷贝/毫升 RT-PCR、NASBA、CDNA、荧光定量PCR HIV感染产妇所生婴儿 婴儿满3个月，再次采