噬菌体展示技术及其应用.pptVIP

* 噬菌体展示技术及其应用 高 建 明 噬菌体是细菌病毒, 在与宿主细胞特异性受体结合并注入其DNA 后, 能将其DNA 整合进宿主基因组(溶原性) , 或用于合成新的噬菌体颗粒。在真核宿主中, 噬菌体不能复制, 如无合适的原核宿主, 噬菌体如同无生命的颗粒性抗原。 噬菌体可以是单股DNA (如M 13、fd 和f1)、双股DNA (如λ 噬菌体)、双股RNA (如f6) 或单股RNA (如M S2 和Q B)。噬菌体在自然环境中普遍存在, 数量和种类远多于细菌。 噬菌体展示技术（Phage Display techniques，PDT）起源于1985年,是一种用于筛选和改造功能性多肽、蛋白质强有力的生物技术，广泛应用于蛋白组学、基因克隆等多个分子生物学领域。 目前噬菌体展示技术的研究进展非常迅速，在抗原决定簇的定位、蛋白质相互作用位点的确定、特异调节分子的分离和人工抗体和疫苗的制备、诊断技术、酶抑制剂的研究开发、多肽药物的研制等生物技术研究的不同领域得到了应用，并对这些领域产生了深远的影响。 噬菌体展示的基本原理 在噬菌体衣壳蛋白基因中插入外源基因，形成融合蛋白表达在噬菌体颗粒蛋白的表面，被展示的多肽或蛋白质可保持相对独立的空间结构和生物学活性。 利用靶分子，采用适当的淘洗方法（亲和→洗脱→扩增→亲和的循环步骤