卡那霉素叶片涂抹法筛选转基因大豆植株的有效性-西北农林科技.PDF

( ) 第34 卷　第 12 期 西北农林科技大学学报 自然科学版 . 34 . 12 V o l N o 2006 年 12 月 . . . . ( . . . ) . 2006 Jou r o f N o r thw e st Sci T ech U n iv o f A gr i an d Fo r N at Sci E d D ec 卡那霉素叶片涂抹法筛选转基因 大豆植株的有效性 1, 2 2 1, 2 刘　斌 , 吴　迪 , 侯文胜 ( 1 西北农林科技大学 动物科技学院, 陕西 杨凌 7 12 100; 2 中国农业科学院 作物科学研究所, 北京 100081) 　　[摘　要]　以吉林小粒 1 号大豆为材料进行卡那霉素梯度涂抹试验, 确定卡那霉素筛选的最佳浓度和筛选临 ( ) 界观察时间, 并在此基础上, 对转基因大豆植株 含np t 基因 分离后代进行卡那霉素涂抹检测和PCR 检测, 检验2 种方法的符合度。结果表明, 卡那霉素的最佳筛选浓度为500 , 观察时间以3 为宜; 抗和高抗卡那霉素植株2 m g L d 种检测方法的符合度为90. 8% , 感和高感卡那霉素植株的符合度为87. 1% 。可见, 卡那霉素叶片涂抹法完全可以用 于大豆转基因植株的快速筛选。 [ 关键词]　大豆; 转基因植株; PCR ; 卡那霉素 [ 中图分类号]　 52. 035. 3 　　　　[ 文献标识码]　 [ 文章编号]　167 19387 (2006) S A 　　随着植物转基因研究的不断深入和规模化水平 那霉素叶片涂抹法在转基因大豆植株田间快速筛选 的不断提高, 对转基因植株的快速、大规模筛选提出 中的具体应用方案, 并比较了其检测结果与PCR 检 了新的要求。为了便于选择, 大多数研究通常利用标 测结果的符合度, 探讨了其有效性和可靠性, 以为实 记基因与 目的基因的连锁关系, 通过检测标记基因 现田间转基因大豆的快速检测奠定基础。 的存在, 间接证明目的基因的存在。 1　材料与方法 目前, 在用于转基因植株筛选的多种遗传选择 标记基因中, 仍以np t 基因应用最为广泛, 其编码 1. 1　试验材料 产物—