人教版选修3专题1第二节基因工建的基本操作程序(共44张PPT)(1).pptVIP

1.2 基因工程的基本操作程序; 彩色棉种子中引入了抗虫害基因，因此种植过程中基本不使用农药。后期产品加工过程中也很少需要使用辅助的化学品。因此，彩色棉是真正意义上的“绿色产品”。 ;基因工程：按照人们的意愿，进行严格设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 ——是在DNA分子水平的设计和施工，其中变异属于基因重组。;1.2基因工程的基本操作程序;为什么要有“目的基因的获取”这一步？ 基因工程是指按照人们的愿望创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。”这里所说的“更符合人们需要”，就是目的。有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。 为什么要有“表达载体的构建”这一步？ 单独的DNA片段──目的基因是不能稳定遗传的。构建表达载体的目的是为了使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能表达和发挥作用。 为什么要有“目的基因导入受体细胞”这一步？ 含有目的基因的表达载体只有进入受体细胞，并且维持稳定和表达，才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。 为什么要有“目的基因的检测与鉴定”这一步？ 目的基因是否真正插入受体细胞的DNA中，是否能够在受体细胞中稳定遗传和正确表达，只有通过检测、鉴定才能得知。;;一、目的基因的获取;提取某种生物的全部DNA;提取某种生物的某器官或特定发育时期的mRNA; 真核生物的基因用逆转录法得到的cDNA与原基因相同吗？有哪些差异？原核生物基因呢？;; 下图表示基因工程中获取同种目的基因DNA片段的不同方法。有关叙述中正确的是 A.①②③片段均不含内含子，但含非编码区 B. ①②③碱基对的排列顺序均相同 C.获取真核生物的目的基因，一般使用方法b D.这三种方法都用到酶，都是在体外进行; 为了有效地保存基因文库，可通过细菌的繁殖而使包含各个特定 DNA片段的细菌增多。液体培养不适用于这一目的，因为各个细菌的生存和繁殖能力不同，各个克隆被保存的机会也会因此而不相等。 在固体培养基上每一个细菌单独形成一个菌落，各个细菌并不相互干扰和竞争，因而有利于全部克隆的保存。形成的每一个菌落中大约包含107个细菌，这样一个基因文库中的所有的克隆几乎都扩增了107倍。把培养皿上的细菌全部洗下加以保存，便可以在需要时从中取得任何一个克隆。 ;依据：目的基因的有关信息。 如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性;？为什么要构建基因文库？直接从含有目的基因的生物体内提取可以吗？;2、利用PCR技术扩增;5/;PCR技术扩增过程;反转录法;一、目的基因的获取;12．“X基因”是DNA分;利用PCR技术扩增;;二、基因表达载体的构建——核心;【注意】　①切割质粒和目的基因的限制酶必须是同一种酶，以获得相同的黏性末端，利于重组质粒的构建。 ②插入的目的基因只是结构基因部分，其表达需要调控序列，因而用作载体的质粒的插入部位前须有启动子，后须有终止子。 ③将目的基因导入受体细胞 a．目的：目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 b．受体细胞种类不同，导入方法不同 在整个工程中，只有第三步将目的基因导入受体细胞过程中不发生碱基互补配对，其他步骤均发生配对。 Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti质粒的T－DNA中是利用T－DNA的可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体特点。;二、基因表达载体的构建——核心;在构建基因表达载体时，主要考虑以下几方面的因素： （1）基因的特点：如果一个来自动物的目的基因含有内含子，就不能用于转基因植物，因为动物中内含子的剪接系统与植物的不同，植物不能将动物基因的内含子剪切掉，只能用该基因的cDNA。基因的产物如果是一个糖蛋白，那么该基因在原核生物细菌中表达出来的蛋白就可能不具备天然状态下的活性，因为糖蛋白上的糖链是在内质网和高尔基体内加上的，而细菌无这些细胞器。 （2）要选择强启动子或组织特异性启动子。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位。启动子有强有弱，选择强启动子可以增加转录活性，使基因产物量增多。如果希望基因在生物的某个组织表达，如只在植物种子中表达，就要选择种子中特异表达的启动子。 （3）要有选择标记基因，如抗生素基因，以便选择出真正的转基因生物。;三、将目的基因导入受???细胞—转化;1、将目的基因导入植物细胞;（2）基因枪法;胚珠;（3）花粉通道法;2、将目的基