植物细胞培养..pptVIP

第5章 植物细胞培养与次级代谢产物制备 细胞培养与组织培养的区别 1979年国际组织培养协会专业术语委员会建议： 组织培养：从机体内取出组织或细胞，模拟机体内生理条件，在体外进行培养，使之生存或生长成组织。 细胞培养：动植物细胞在体外条件下的存活或生长，此时细胞不再形成组织。 植物细胞培养的特点 与微生物相比 细胞大（30-100倍） 成团 不耐剪切 生长慢，周期长 易污染（培养基适于微生物生长） 光照影响较大，氧气、二氧化碳含量影响较大。 5.2 植物细胞培养技术 5.2.1 培养基 5.2.2 植物单细胞分离与小规模培养 5.2.2.1 单细胞分离方法 （一）机械法 具体做法： 将叶片轻轻研碎、过滤离心、收集净化 从未分化的疏松易碎的愈伤组织，通过摇床振荡获得分散的单细胞或小细胞团 优点： 细胞不受酶伤害；有利于进行细胞的生理和生化研究。 5.2.2.1 单细胞分离方法 （二）酶解法 酶对细胞壁有一定的软化作用，所以采用酶法时，必须加入甘露醇等渗透压保护剂；可通过加入硫酸葡聚糖钾来提高游离细胞的产量。(纤维素酶，果胶酶) 优点 可获得较多的叶肉游离细胞（但对禾本科植物叶片效果不好）。 5.2.2.1 植物单细胞小规模培养 培养方法 （一）看护培养 （二）饲养层培养 （三）液体浅层静止培养 （四）细胞同步化培养 （五）细胞平板培养 （六）微室培养 （一）看护培养（nu