白蜡虫蜡酯合酶基因cDNA全长克隆及原核表达-林业科学研究.PDFVIP

林业科学研究　２０１６，２９（４）：６１０ ６１４ ＦｏｒｅｓｔＲｅｓｅａｒｃｈ 　　文章编号：１００１１４９８（２０１６）０４０６１００５ 白蜡虫蜡酯合酶基因ｃＤＮＡ全长克隆及原核表达 刘博文，王雪庆，孙　涛，亓　倩，于淑惠，杨　璞，陈晓鸣 （中国林业科学研究院资源昆虫研究所，国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室，云南 昆明　６５０２２４） 关键词：白蜡虫；蜡酯合酶；ｃＤＮＡ全长基因；原核表达 中图分类号：Ｓ８９９．１ 文献标识码：Ａ ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＰｒｏｋａｒｙｏｔｉｃＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＷａｘＳｙｎｔｈａｓｅＧｅｎｅｏｆ ｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＷｈｉｔｅＷａｘＳｃａｌｅ ＬＩＵＢｏｗｅｎ，ＷＡＮＧＸｕｅｑｉｎｇ，ＳＵＮＴａｏ，ＱＩＱｉａｎ，ＹＵＳｈｕｈｕｉ，ＹＡＮＧＰｕ，ＣＨＥＮＸｉａｏｍｉｎｇ （ＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＲｅｓｏｕｒｃｅｓＩｎｓｅｃｔｓ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ，ＫｅｙｌａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｕｌｔｉｖａｔｉｎｇａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＲｅｓｏｕｒｃｅｓ ＩｎｓｅｃｔｓｏｆＳｔａｔｅＦｏｒｅｓｔｒｙＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，Ｋｕｎｍｉｎｇ　６５０２２４，Ｙｕｎｎａｎ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］ＴｏｏｂｔａｉｎｔｈｅｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｔｈｅｗａｘｓｙｎｔｈａｓｅ（ｗｓ）ｇｅｎｅｏｆｔｈｅｗｈｉｔｅｗａｘｉｎ ｓｅｃｔ，ＥｒｉｃｅｒｕｓｐｅｌａＣｈａｖａｎｎｅｓ，ａｎｄｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓｌｙｅｘｐｒｅｓｓｔｈｅｅｎｚｙｍｅｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ．［Ｍｅｔｈｏｄ］Ｔｈｅ３′ａｎｄ５′ ｅｎｄｓｏｆｔｈｅｗｓｇｅｎｅｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｓｅｐａｒａｔｅｌｙｂｙｕｓｉｎｇＲＡＣＥ，ａｎｄｔｈｅｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ ａｆｔｅｒｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｔｈｅｗｓｇｅｎｅ．Ｆｉｎａｌｌｙ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＷＳｉｎＥｒｉｃｅｒｕｓｃｏｌｉ ＢＬ２１ｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙＩＰＴＧ．［Ｒｅｓｕｌｔ］Ｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ，ｔｈｅｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｏｆｔｈｅｗｓｇｅｎｅｗａｓ １５１８ｂｐ，ｗｈｉｃｈｉｎｃｌｕｄｅｄｔｈｅ５′ＵＴＲ（ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄｒｅｇｉｏｎ）ｗｉｔｈ９４ｂｐ，３′ＵＴＲｗｉｔｈ６８ｂｐ，ａｎｄｔｈｅｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇ ｆｒａｍｅｗｉｔｈ１３５６ｂｐ．Ｔｈｅｇｅｎｅｗａｓｄｅｄｕｃｅｄｔｏｅｎｃｏｄｅ４５２ａｍｉｎｏａｃｉｄｒｅｓｉｄｕｅｓｗｉｔｈｔｈｅｐｕｔａｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔｏｆ５１．８ｋＤａ，ａｎｄｔｈｅｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃｐｏｉｎｔｏｆ６．３５．ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｒｅｓｕｌｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ，ｔｈｅＷＳｅｎｚｙｍｅ ｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｉｎＥｒｉｃｅｒｕｓｃｏｌｉ．［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｔｈｅｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｏｆｔｈｅｗｓｇｅｎｅｏｆ Ｅｒｉｃｅｒｕｓｐｅｌａｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄ，ａｎｄｔｈｉｓｅｎｚｙｍｅｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＥｒｉｃｅｒｕｓｃｏｌｉ，ｗｈｉｃｈｐｒｏｖｉｄｅｓｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ ｆｏｒｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｗａｘｅｓｔｅｒｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎｏｔｈｅｒｉｎｓｅｃｔｓ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｅｒｉｃｅｒｕｓｐｅｌａ；ｗａｘｓｙｎｔｈａｓｅ；ｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅ；ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ 白蜡虫（Ｅｒｉｃｅｒｕｓｐｅｌａ）是我国特有的资源昆虫， 是催化蜡酯合成过程最后一步的关键酶，是研究生 ［１］ 物蜡酯合成的关键。 泌蜡是白蜡虫二龄雄虫最为特化的性状 。白蜡虫 分泌的白蜡在食品、医药、纺织等行业具有重要的经 前期研究通过转录组测序及实时