神经干细胞前体细胞分化的功能学鉴定研究进展-生物化学与生物物理.PDFVIP

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2008, 35(8): 886~891 经干细胞前体细胞分化的功能学鉴定研究进展* / 奇 李小永 蒋星红** (苏州大学医学部神经生物学教研室，衰老与神经疾病实验室，苏州215123) 摘要 神经干细胞/ 前体细胞分化是神经生物学研究的热点 以往对神经干细胞/ 前体细胞分化水平的鉴定主要依赖于形态 学指标，而随着膜片钳技术的应用，神经干细胞/ 前体细胞分化过程中膜电特性的改变、离子通道活动等功能学指标越来越 受到重视 综述了利用膜片钳技术研究神经干细胞/ 前体细胞功能分化的最新进展，并对存在的问题做出思考和展望 关键词 神经干细胞/ 前体细胞，细胞分化，膜片钳，电生理 学科分类号 R338.8，Q254 神经干细胞分化是当前基础研究的热点问题， 神经干细胞前体细胞膜电学特征 且有着广泛的应用前景 细胞分化是环境因素作用 1 / 下基因差异性表达的结果，是一具有高度时空特异 1 1 被动膜电学特性 性的程序性过程 不同的作用因素只有在特定的时 利用膜片钳技术可以测量钳制细胞的静息膜电 间窗口才能发挥作用，引起的变化又为下一步的作 位 (resting membrane potential, RMP) 、 膜电 容 用及变化打下基础 这些特定的变化就可以作为检 (membrane capacitance, Cm) 、 膜 输 入 阻 抗 测指标来鉴定细胞分化，这些指标包括形态学指 (membrane input impedance, Rin)及细胞膜的时间常 标、生物化学指标和功能学指标 以往对神经干细 数( )等被动膜电学特征参数 神经干细胞/ 前体细 胞分化的鉴定主要依赖于形态学指标，包括活细胞 胞等未成熟细胞的这些参数与成熟的神经元相比有 光镜下观察及标志物的免疫细胞化学染色 但在很 显著差异，因此可作为细胞未成熟的一个参考指 多情况下，形态上的成熟表现或标志物的表达并不 [1] 标 Liu 等 报道根据电流电压曲线(I-V curve)可将 能真实反映细胞的分化水平 功能成熟才是鉴定细 大鼠脑室下区(subventricular zone, SVZ)或脊髓来源 胞分化水平的最有效指标 随着目前膜片钳技术的 的表皮生长因子 / 碱性成纤维细胞生长因子 广泛应用，神经干细胞/ 前体细胞分化过程中膜电 (epidermal growth factor/basic fibroblast growth factor, 特性、离子通道活动等功能改变越来越受到重视 EGF/bFGF) 应性神经前体细胞分为三种类型： 膜片钳技术结合分子生物学技术更可以从基因到蛋 型表现为延迟外向整流； 型无整流，I-V 曲线呈 域 白质的多个水平来检测细胞分化进程中的特异性变 线性； 型既有外向又有内向整流 由于离子通道 芋 化，并通过功能学指标与生物化学、形态学指标相 在一定的膜电位时开放或关闭，使膜电导随电压变 结合来更好地解释这些变化 神经干细胞/ 前体细 化而改变，I-V 曲线不呈线性而呈向上或向下弯曲 胞分化的功能学鉴定还存在很多问题，目前大多数 的曲线，称为整流 曲线向上弯曲为外向整流，指 研究还停留在对单个细胞的检测上，而神经细胞功 膜对离子的通透性随去极化而增加 反之，曲线向 能的实现有赖于细胞与细胞间构建有效的联系 本 文主要综述利用膜片钳技术研究神经干细胞/ 前体