恩普生化检验基础.ppt

临床生化检验基础 ;目 录;概 述;标本种类： 血液 尿液 脑脊液 胸腹水 精液 ;血 液 的 组 成;血液的组成;血液的组成;血清和血浆的区别： 血清中缺少了凝血系统中的某些凝血因子（凝血过程中被消耗）如凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、凝血因子Ⅱ（凝血酶原）、凝血因子Ⅴ（易变因子）、凝血因子Ⅷ（抗血友病球蛋白AHG）等。;分析物 ;总蛋白 白蛋白 TSH 转铁蛋白 AST 肌酸激酶 总胆红素 钠 铁 胆碱酯酶 碱性磷酸酶 直接胆红素 甘油三酯 LDH 无机磷 钾 GGT 三碘甲状腺素 乳酸;标本的采集;标本的采集;标本的采集;标本的处理;标本的处理;分离注意事项： 转速不够，离心不彻底，不能很好的将血清分离，在血清中容易夹杂纤维蛋白，在测试过程中容易堵针，影响测试。 转速过高，容易造成溶血。 例：10cm离心半径的离心机，我们要得到生化分析的合格标本，应选择3662～4012之间转速，离心10min即可。;标本的运输和保存;手 段;检 测 仪 器;检 测 试 剂;试剂指示系统和化学原理;检 测 试 剂;NAD+－NADH(NADP+－NADPH )指示系统 ： ALT为例： R1： NADH 、乳酸脱氢酶（LDH） R2： L-丙氨酸 、α-酮戊二酸 ALT L-丙氨酸 +α-酮戊二酸 → 丙酮酸 + L-谷氨酸 LDH 丙酮酸 + NADH + H+ → L-乳酸 + NAD+ + H2O;p-NP和p-NA指示系统 ： p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰，根据405nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。 目前利用此指示系统进行测定的临床项目有ALP、r-GT、AMY等。;p-NP和p-NA指示系统 ： ALP为例： R1：AMP缓冲液 、MgCl2 R2：对硝基苯磷酸盐 ALP 对硝基苯磷酸盐+H2O → 磷酸盐+对硝基苯酚;检 测 试 剂;检 测 试 剂;检 测 试 剂;检 测 试 剂;检 测 试 剂;检 测 试 剂;检 测 试 剂;试剂线性范围： 生化试剂线性范围是指测试结果与反应度R成线性的范围，根据试剂说明书给定输入。 生化试剂线性范围实际上是指该试剂所能检测到的样本最高浓度。 当出现超出线性范围时，应对样本进行稀释后重新测量。;常用生化项目???化学性质分类： 酶 类 底物代谢类 无机离子类 特种蛋白类;常用生化项目按临床性质分类： 肝功能 肾功能 血糖 血脂 心肌酶谱 ;常见生化项目之间的关系： GLO＝TP－ALB A/G＝ALB/GLO O/P＝AST/ALT I-BIL＝T-BIL－D-BIL AⅠ/B＝ApoAⅠ/ApoB CK-MM＝CK－CK-MB LDL-C＝T-CHO－HDL-C－TG/5（重量单位） ＝T-CHO－HDL-C－TG/2.2（法定单位） AG＝Na＋―Cl－―HCO3－ ＝Na＋＋K＋―Cl－―HCO3－ ;检 测 方 法;方法： 吸收光谱法：比色分析基于溶液对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法。 比浊法：通过监测物质对光的散射透射强度来测定的方法，比浊法是一种浊度测定，而不是比色测定。 ;吸收光谱法： 终点法 一点终点法 二点终点法 动力学法（零级动力学法） 固定时间法（一级动力学法）;终点法： 一点终点法公式： C样本＝(A样本－A试剂空白/A标准－A试剂空白)×C标准 F＝C标准/（A标准－A试剂空白） C样本＝（A样本－A试剂空白）×F 反应度计算：R＝ A样本－A试剂空白;终点法： 二点终点法（样本空白法）公式： C样本＝(A样本－A样本空白/A标准－A标准空白)×C标准 F＝C标准/（A标准－A标准空白） C样本＝