基于酶抑制法的农药残留快速比色检测.pdf

第 30 卷 第 6 期 农 业 工 程 学 报 Vol.30 No.6 242 2014 年 3 月 Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering Mar. 2014 ·农产品加工工程· 基于酶抑制法的农药残留快速比色检测 1 1 2 1 1※ 朱松明 ，周晨楠 ，和劲松 ，张雪吟 ，郭希山 （1. 浙江大学生物系统工程与食品科学学院，杭州 310058 ； 2. 云南农业大学食品科学技术学院，昆明 650201 ） 摘 要：基于有机磷与氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AChE ）的抑制作用，以吲哚酚 乙酸酯为酶促水解反应的显色底物，制备了一种抛弃型农药残留快速检测酶片；通过优化试验，用物理吸附法将 AChE 固定到尼龙膜 Hybond N+膜上，经真空冷冻干燥后，酶活回收率可达 27.3% ；该酶片显色结果为蓝绿色， 通过比较显色强度的变化，酶片对农药标样氧乐果、毒死蜱、甲萘威与抗蚜威的检出限分别为 1、0.05、1.5 与 0.8 μg/mL ，均达到食品中的最大残留限量标准；将研制的酶片用于葡萄汁与小白菜样品的检测结果证实，该酶片 具有灵敏度高、准确度高、重现性好等优点，可用于农产品中有机磷与氨基甲酸酯类农药残留的快速定性筛检。 关键词：农药；酶；农产品；乙酰胆碱酯酶；吲哚酚乙酸酯水解；比色检测 doi ：10.3969/j.issn.1002-6819.2014.06.029 中图分类号：TS201.6 ；S481+ .8 文献标识码：A 文章编号：1002-6819(2014)-06-0242-07 朱松明，周晨楠，和劲松，等. 基于酶抑制法的农药残留快速比色检测[J].农业工程学报，2014，30(6)：242－ 248. Zhu Songming, Zhou Chennan, He Jingsong, et al. Rapid colormetric detection of pesticide residues based on enzyme inhibition method[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering (Transactions of the CSAE), 2014, 30(6): 242 －248. (in Chinese with English abstract) 现有的农药残留检测方法主要为以下几种：色 0 引 言 谱法[9-11] 、生物传感器检测法[12-14]等。其中，色谱 农药的使用有助于降低病虫害，提高农作物产 法等仪器分析方法是目前比较权威的方法，具有精 量。然而过量使用农药会造成农药残留超标，进而 确、定量的优点。但其缺点是所需的仪器设备价格 引发农产品安全问题[1-4] 。中国的农药生产量与使用 昂贵，需要有专业人员操作，不适合在现场快速筛 量排名世界第一，而其中有机磷农药及氨基甲酸酯 选。生物传感器检测法响应时间短，灵敏度高，仪 类农药由于价格低、杀虫谱广、击倒快的特性，被 器自动化程度高，适合现场检测，其中基于酶抑制 广泛用于农业生产中。20 世纪 80 年代至 21 世纪初 法[15]制备的生物传感器由于酶促反应灵敏迅速，成 期，有机磷与氨基甲酸酯类农药的使用量最多时占 为农药残留快速检测技术研究热点。 到了农药总产量的 70% 以上，虽然现在国家大力推 现有的国标比色速测卡法[16]利用有机磷与氨 广生物农药等