不同时间下超低温保存肝癌组织细胞RNA完整性的差异分析.PDF

( ) 20 7 2 7  Chin J Cell Stem Cell (Electronic Edition), Feb 20 7,Vol.7, No.  中华细胞与干细胞杂志 电子版 年 月第 卷第 期 49 · · ·论著· 不同时间下超低温保存肝癌组织细胞 RNA 完整性的差异分析       2   曹国强 张峰 陈雷鸣 陈海 李彪 冯晓文 李红春 谢海洋 周琳 【摘要】  目的  研究肝癌组织细胞样本于-80 ℃超低温保存条件下的质量控制，探讨肝癌 组织细胞样本在超低温保存中的时效性。方法  随机抽取超低温新鲜冻存（24 h 内）、保存3 个 月、6 个月和 年不同时长的肝癌和对应的癌旁组织细胞各2 对，HE 染色评估标本取材的准确 性，采用Promega 自动提取核酸仪提取肝脏细胞RNA ，利用Agilent 2 00 生物分析仪进行RIN 值及28S/ 8S 比值分析。对新鲜冻存、保存3 个月、6 个月以及 年的组织细胞样本的RIN 值和 t 28S/ 8S 比值进行组间非配对 检验。结果  HE 染色镜下观察发现切片组织细胞中肿瘤细胞比 例达到80 ﹪以上，为生物样本库的合格样本。生物分析仪检测结果显示超低温新鲜冻存、保存 3 个月、6 个月和  年的癌和癌旁组织细胞的RIN 均值均7.0，平均28S/ 8S 比值均 .5，组间 t vs P 非配对 检验显示，保存 年的肝癌组织细胞相比于新鲜冻存（7.442 ±0.674 8.67 ±0.769， = vs P vs 0.00）、保存3 个月（7.442 ±0.674 8.275±0.67，= 0.005）和6 个月（7.442 ±0.674 8.75±0.970， P = 0.043 ）的组织细胞RIN 值显著下降，提示存在一定程度的RNA 降解，而其余各组之间差异 P 均无统计学意义（ 均 0.05 ）。结论  在超低温条件下新鲜冻存、保存3 个月、6 个月的肝癌及 癌旁组织细胞，其质量均可以获得有效保证，而保存  年的肝癌组织细胞的RNA 虽然存在一定 程度的降解，但能够满足后续临床科研的要求。 【关键词】  肝肿瘤； 组织细胞； RNA ； 低温保存 Analysis of RNA integrity of hepatocellular carcinoma cells with different cryopreservation 1 1 1 1 1 1 times Cao Guoqiang , Zhang Feng , Chen Leiming , Chen Hai , Li Biao , Feng Xiaowen , Li 2 1 1 1 Ho