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皱叶酸模试管苗培养探究 摘要：为了对野生资源进行保护，同时满足人们的需求， 以具生长点的皱叶酸模茎段为材料，采用植物组织培养方 法，对生长点的分化培养、分化芽生根培养、试管苗移栽、 定植进行了研究。结果表明：MS+NAA0.05 mg?L-1+6-BA2. 0 mg?L-1+蔗糖30 g?L-1是皱叶酸模生长点分化培养的理想 培养基；诱导分化芽生根的理想培养基是MS+IAA0. 2 mg ? LT+蔗糖30 g ? L-1；最佳的分化模式是先生根，再加 入液体形式的最适分化培养基；试管苗移栽成活率高达 100%,定植的试管苗保持了野生植株的生物学性状。 关键词：皱叶酸模；组织培养；无性系 中图分类号：S336文献标识码：A DOI编码： 10. 3969/j. issn. 1006-6500. 2012.06.029 皱叶酸模(Rumex crispus)为蓼科(Polygonaceae) 酸模属多年生草本植物，又称土大黄、羊蹄叶子等［1］。该 植物广泛分布，多生于河流、湖泊沿岸及水溪旁。其根可入 药，含大黄酚(Chrysophanol大黄素(Emodin)、色素、 有机酸、草酸钙、辣质、树脂、糖类、淀粉及黏液质等。其 功能为清热解毒，止血，通便，杀虫。临床主要用于治疗鼻 出血，子宫出血，血小板减少性紫瘢，大便祕结等；外用治 外痔，急性乳腺炎，黄大疮，疽肿，皮癣等［2］。由于皱叶 酸模具有重要的药用价值，多年来人们都在大量地采挖药 用，再加之生态环境的破坏，使该药用植物的野生资源迅速 减少。为保护这种野生药用植物，研究者对其进行了无性系 建立的研究。近年来，已有学者对蓼科植物愈伤组织培养进 行了研究[3-6],而对于皱叶酸模的研究多集中在皱叶酸模 的化学成分及其含量的分析方面[2-8],并且迄今未见皱叶 酸模组织培养及试管苗培养的报道。本研究以生长旺盛的皱 叶酸模嫩芽为材料，成功地探究出皱叶酸模嫩芽的理想分化 及生根培养基，为皱叶酸模无性系的建立奠定了基础。 1材料和方法 1. 1材料与灭菌 采集大连郊区水库旁生长旺盛的皱叶酸模，剪取具有嫩 芽的嫩苗或嫩茎，放到250 mL的磨口广口瓶中，用自来水 振荡洗涤20 min左右，接着用0. 05%安利洗涤剂振荡洗涤2? 3 min,再用自来水漂洗至泡沫消失时转移到超净工作台上, 然后加75%酒精灭菌10?20 s,迅速倒入无菌水，振荡洗涤 3次，再加入0. 05%HgC12溶液振荡灭菌1 min,再加入等体 积无菌水，使HgC12灭菌液的浓度变为0. 025%,继续振荡灭 菌14 min,接着用无菌水振荡洗涤5次，即获得无菌材料。 1.2培养条件 1. 3方法 1.3.1芽的分化培养在超净工作台上，将无菌材料剪 成带芽的小段接种到以MS为基本培养基，附加不同浓度的 6-BA、KT和NAA的培养基上进行分化培养，每种培养基接种 培养30个材料，进行不同浓度生长调节剂对芽分化的影响 试验。将接种的材料放置在恒温培养箱中，给予1 000 Lx 的光照。培养25 d后统计，试验重复2次。 1.3.3试管苗移栽的方法 从含不同生长素生根培养基 中，各取出长势较好的试管苗80株，用清水洗去根部的培 养基，不经过炼苗，将其中的40株试管苗直接移植到添有 1/2河沙和1/2园土的花盆中，另外40株移植到室外背阴处。 移栽后前7 d花盆放在没有阳光直射的环境中，7 d之后将 花盆搬至太阳下。40 d后，与室外的移栽苗一起统计成活率。 2结果与分析 2. 1不同浓度生长调节剂对芽分化的影响 3讨论 本研究中，在添加浓度为2.0 mg?L-l的6-BA时，皱 叶酸模芽的分化率最高，搭配低浓度的NAA分化芽数较多。 25 d的平均分化芽数为6. 3个，按照这个速度，一年能繁殖 出6.314.6个试管苗。利用这种方法进行繁殖，在较短的时 间内就能繁殖出大量的试管苗。满足了栽培对种苗的需求， 实现了对皱叶酸模野生资源的保护。用本研究中的生根培养 基培养出的皱叶酸模试管苗，基本没有无效苗，这也极大地 提高了繁殖速度。 移植到花盆和室外的试管苗没有经过炼苗的过程，直接 移植到土中的试管苗在一周内就能恢复正常的生长，且生长 旺盛，可能由于以下几点原因：一是在选择移植的试管苗时, 首先选择的是生长较旺盛，根系发达的试管苗；二是在生根 和分化培养的时候加入了许多生长素，在试管苗移植之后， 仍然有一部分生长素残留在植物内部或根部，这些生长素可 以对植物的进一步生长发挥作用；三是无论是皱叶酸模的试 管苗还是野生苗都有很强的抗性和对新环境的适应能力。这 些都使得皱叶酸模的试管苗不用经过炼苗，直接移植就能很 旺盛的生长。 参考文献： 李书心?辽宁植物志(下册)[M].沈阳：辽宁科学 技术出版社,1991： 569. 江苏新医