分析血清中7种类固醇激素的临床研究-Waters.PDF

[ 应用纪要 ] 分析血清中7种类固醇激素的临床研究 Dominic Foley和Lisa Calton 沃特世公司(英国威姆斯洛) 应用优势 简介 ■ 色谱方法具有出色的分析选择性， 类固醇激素是一大类小分子，在代谢过程中发挥着非常重要的作用，例如性 可以分离同分异构体 别特征调节、血压调节和炎症反应调节等。参与类固醇生物合成的某些酶类 ■ 利用多孔板配置实现高通量的 在这些代谢过程中非常关键。通过测定合成途径中的类固醇激素，可以监测 LC-MS/MS分析 这些酶是否出现功能异常。若使用免疫分析法测定这些类固醇激素，由于抗 体试剂会与结构相似的类固醇激素以及合成途径的衍生物发生交叉反应，因 ■ 睾酮、雄烯二酮、17-OHP、DHEAS 此分析极易受到干扰。而使用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定这些类 和皮质醇的分析结果与EQA质谱法 固醇激素可以获得极高的灵敏度、准确度和精密度。 平均值具有良好的一致性 本应用纪要介绍了一种分析睾酮、雄烯二酮、17-羟基孕酮(17-OHP)、脱氢表 雄酮硫酸盐(DHEAS)、皮质醇、11-脱氧皮质醇和21-脱氧皮质醇的临床研究方 法，该方法使用Oasis PRiME HLB µElution板从血清中富集纯化目标分析物 (工作流程已采用Tecan Freedom EVO 100/4液体处理器实现了自动化)，然后 使用配备ACQUITY UPLC HSS T3 VanGuard保护柱和ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱的ACQUITY UPLC I-Class系统进行色谱分离，最后在Xevo TQ-S micro质谱仪(图1)上进行检测。此外，本研究还通过分析睾酮、雄烯二酮、 沃特世解决方案 17-OHP、DHEAS和皮质醇的室间质量评估(EQA)样品评估了该方法的偏差， Oasis™ PRiME HLB µElution板 以此判断该方法是否适合在临床研究中用于类固醇分析。 ACQUITY UPLC™ HSS T3色谱柱 ACQUITY UPLC HSS T3 VanGuard™ 保护柱 ACQUITY UPLC I-Class系统 (FT N) Xevo™ TQ-S micro MassLynx™ 软件 TargetLynx™应用管理软件 MassLynx LIMS Interface v3.0 Tecan文件转换器v2.0 关键词 睾酮，雄烯二酮，17-OHP，DHEAS，皮质 醇，11-脱氧皮质醇，21-脱氧皮质醇，SPE， LC-MS/MS，Xevo TQ-S micro ，自动化 图1. Waters™ ACQUITY UPLC I-Class 系统和Xevo TQ-S micro 。 1 [ APPLICAT ION NOT E ] [ 应用纪要 ] 实验 样品制备