课件：静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学.ppt

讨论 此外，实验中的注意事项有： 1. 动物实验取血时要防止凝血，取血时间点要准确。 2. 用HPLC测定时，标准曲线和样品要在同一台仪器上测。 3. 每次进样量要固定。平行操作减少误差。 4. 色谱柱使用前要活化，更换流动相后要平衡30min-1h。实验结束后要用甲醇冲柱子。 Thank you！ 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析 主要经营：课件设计，文档制作，网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求 * * * 吕文婷 侯婷 黑红亚 姚海岩 侯碧玉 肖飞燕 静脉注射加替沙星在家兔体内的药代动力学 实验目的 1.学会测定家兔血药浓度的方法 2.掌握HPLC的使用 3.掌握药代动力学参数的计算 实验原理 加替沙星为第三代喹诺酮类药物。 喹诺酮类药物是一种DNA旋转酶抑制剂, 它作用于细菌DNA旋转酶, 干扰DNA超螺旋结构的解旋, 从而阻碍DNA的复制, 而呈现杀菌作用。 该类药物的共同特点是: 抗菌作用强大, 抗菌谱较广, 主要对抗革兰阴性菌,对革兰阳性菌也有相当作用。在体内的分布较广, 可进入大多数药物不能进入的骨、关节和前列腺组织等。 加替沙星在体内符合二房室模型 实验材料与仪器 1.1　药物与试剂 盐酸加替沙星。 甲醇( 色谱纯), 醋酸铵, 10%高氯酸溶液, 重蒸水，均为分析纯试剂。 实验材料与仪器 1.2　动物 健康家兔1只 实验材料与仪器 1.3　仪器 高效液相色谱仪 旋涡混合器 离心机 手术器械 实验方法 2.1　色谱条件 色谱柱为ODS柱, 流动相：水相为15mmol/L醋酸铵，醋酸调pH为3.0, 有机相为乙腈。 水相-有机相( 78:22) , 流速1.0ml/ min, 检测波长为293nm, 柱温为40℃。 实验方法 2.2　样品的采集 取健康家兔进行称重,麻醉, 股动脉插管作取血用。 将加替沙星注射液按每30mg/kg从耳缘静脉给药 停止给药后分别于2,5, 10, 15,30,45,60,90,120min时进行血液采集, 装入无菌微量离心管中。 每次取血o.5ml，每管血液中加入1滴肝素抗凝。 离心(4000r/min)15min. 取血浆0.2ml，备用。 实验方法 2.3.1 标准溶液配制 称取100mg加替沙星标准品，加入100ml甲醇，配成1mg/ L母液; 用母液加甲醇。分别稀释成500，250，125，62.5，31.2，15.6，7.8，3.9ug/ml的标准溶液 实验方法 2.3.2 标准曲线 取10ul标准溶液，加入90ul空白血浆，分别稀释成 50，25，12.5，6.25，3.12，1.56，0.78，0.39ug/ml 加 10%高氯酸溶液0.1ml, 混匀, 涡旋震荡3min， 12000rpm离心10min 取上清液120ul转移至另一离心管内，取20μl 进样 以加替沙星浓度C(μg/ ml) 对相应峰面积A回归, 得回归方程。 实验方法 2. 3.3 样品处理 取兔血浆0.1ml, 加 10%高氯酸溶液0.1ml, 混匀, 涡旋震荡3min，12000rpm离心10min 取上清液120ul转移至另一离心管内，取20μl 进样。 计算加替沙星峰面积A,代入标准曲线求得各时间点的血药浓度。 实验方法 2.3.4　用Kinetica 4.4计算药代动力学参数 实验结果 2.4.1.标准曲线 实验结果 实验结果 2.4.2 血药浓度-时间曲线 实验结果 2.4.3 实验结果 2.4.4 c-t图像（kinetica4.4自动生成，权重：1/c2,c为计算值） 实验结果 2.5.5 药代动力学参数 讨论 实验结果可得加替沙星在体内消除符合二房室模型，与文献相符。但求出的药代动力学参数和文献有较大差异，原因可能是： 1. 给药剂量不一样，导致与剂量有关的参数不一样，如AUC，C0等。 2. 文献用的软件是3p87，我们用的是kinetica4.4.不同软件计算方法不一样，可能算出来的结果也不一样。 3. 拟合时可以选择不同的权重系数，权重系数有1,1/c,1/c2等。常用的有1和1/c2(kinetica还有测量值和计算值之分)，不同权重系数的结果差异很大，没有可比性。因此可能有更合适的方法可以用来拟合。 * * *