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植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒是一种旨在通过过硫酸钾的参与,使染料ABTS氧化,在抗氧化剂的存在下,通过分光光度仪,观察其峰值下降的变化,来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力,即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗氧化能力检测。产品严格无菌,即到即用,操作简易,性能稳定。矚慫润厲钐瘗睞枥庑赖賃軔朧碍鳝绢懣硯涛镕頃赎巯驂雞虯从躜鞯烧。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡,甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。在生物系统内,通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等,大分子,例如白蛋白、铜蓝蛋白(ceruloplasmin;CER)、铁蛋白(ferritin)和抗氧化因子,例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素(bilirubin)等,产生抗氧化能力,即捕获自由基的能力,达到消除或降低ROS的损害。通过过硫酸钾(potassium persulfate)氧化2,2’-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(2,2-Azino-bis(3-ethylbenzthiazoline- 6-sulfonic acid),diammonium salt;ABTS)产生的ABTS自由基,衡量体系中抗氧化剂捕获自由基或者消耗抗氧化剂的能力,在分光光度仪(730nm波长)的帮助下,观察其峰值下降的变化,并与标准化抗氧化剂水溶性生育酚Trolox对照。聞創沟燴鐺險爱氇谴净祸測樅锯鳗鲮詣鋃陉蛮苎覺藍驳驂签拋敘睑绑。
产品内容
缓冲液(Reagent A) 毫升
染色液A(Reagent B1) 管
染色液B(Reagent B2) 毫升
氧化液(Reagent C) 毫升
标准液(Reagent D) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于样品存放和标准品配制的容器
4℃微型台式离心机:用于样品处理
96孔板:用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪:用于比色变化
实验步骤
样品准备
选择一:血浆样品
准备好肝素或ACD抗凝管(注意:避免使用EDTA抗凝管)
抽取1毫升血液,置于抗凝管里
放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为700g(或3000RPM,例如eppendorf 5415)残骛楼諍锩瀨濟溆塹籟婭骒東戇鳖納们怿碩洒強缦骟飴顢歡窃緞駔蚂。
小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分(注意:避免触碰白色液体层)
即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存
移取10微升上述制备的血浆到新的1.5毫升离心管
加入xx微升 缓冲液(Reagent A),混匀
放在冰槽里待测
选择二:血清样品
1. 准备好不含抗凝剂的储存管
抽取1毫升血液,置于储存管里
室温下,静置30分钟,直至血液凝结
放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为2000g(或5000RPM,例如eppendorf 5415)酽锕极額閉镇桧猪訣锥顧荭钯詢鳕驄粪讳鱸况閫硯浈颡閿审詔頃緯贾。
小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分(注意:避免触碰白色液体层)
即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存
移取10微升上述制备的血清到新的1.5毫升离心管
加入xx微升 缓冲液(Reagent A),混匀
放在冰槽里待测
选择三:尿液/脑脊液/唾液/精液样品
准备好1.5毫升离心管
移取1毫升液体到离心管
放进4℃微型台
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