课件：流式细胞术的临床应用.ppt

Blood Dendritic Cell Enumeration Kit DC作用： 1.树突状细胞（dendritic cell,DC）为一群非均一性专职抗原递呈细胞，与MHC二类分子结合向其它免疫活性细胞传递抗原信息。 2.骨髓样DC（MDC）和淋巴样DC(PDC).在诱导和调控免疫应答方式上完全不同：首先它们表达不同的抗原识别受体并对不同的抗原起作用；表达不同的细胞因子受体并对不同的细胞因子起反应，即使受到相同的抗原刺激。骨髓样DC（MDC）与Th1效应相关,而淋巴样DC（PDC）与Th2效应有联系； 已经应用的领域包括：1）SLE病人病情和疗效观察；2）AIDS病人免疫机能分析；3）病毒性肝炎病人免疫状况研究；4）疫苗研究。 特点 简便、 快捷、 绝对计数 DC亚群数/ml 最新技术 计数血液中循环内皮细胞的标准方法 循环内皮细胞(CEC)增加于 CELLQUANT FF-CD146 急性冠状动脉综合征 血小板减少性紫癜 镰刀细胞贫血 败血症 狼疮 肾病综合征 器官移植排斥 手术创伤 癌症 传统方法 显微镜检，手工计数。费时，费力，无法标准化 新技术—新标准 CELLQUANT FF-CD146 免疫磁珠富集与3色流式细胞术结合 仅需1 mL血 整个过程不到1个小时 灵敏度高：1mL血中可检测出10个循环内皮细胞 重复性好，室间差(Interlaboratory CV)小 方法 CELLQUANT FF-CD146 将包被CD146单抗的铁磁性纳米颗粒(CD146FF)与1mL 血孵育 富集的CD146+细胞用以下试剂染色 PI(碘化丙啶) (确定有核细胞) CD45-FITC(排除WBC(白细胞)干扰) CD146-PE单抗(识别CD146抗原的另一位点) 标准浓度微球(用于绝对计数) 流式分析(循环内皮细胞鉴定) 有核细胞(PI+); CD45-; CD146+;前向散射角(FSC)范围宽 CELLQUANT FF-CD146 PI-CD45 FITC CELLQUANT FF-CD146 PI-CD45 FITC CELLQUANT FF-CD146 CELLQUANT FF-CD146 CELLQUANT FF-CD146 第四部分 在医学研究中的应用 优点： 1.临床医师进行疾病细胞免疫研究的一种好工具 2.可同时进行临床基础研究和疾病诊断、疗效评价 3.可与世界研究水平同步 4.临床医师不需亲自参与试验过程 5.研究工作周期短 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析 主要经营：课件设计，文档制作，网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求 * * * * * 移植免疫 四聚体 Tetramer-原理 内源性抗原 外源性抗原 Tetramer-原理 MHC Class I-HLA-A2 Tetramer-原理 Tetramer-原理 国外医学免疫学分册 2001；24(2):102-105 HLA Class I 限定性肿瘤抗原肽 抗原特异性CTL的分析方法 51Cr释放实验 PCR法 酶联免疫斑点法(ELISPOT) 扩增特异T淋巴细胞受体 Tetramer法 间接法 需大量的特异性CTLs作为效应细胞 需体外扩增，周期长，敏感性低， 费时费力 难以广泛应用 敏感性高 但只能用于已知TCR基因型的特异性CTLs检测 直接法 敏感性高 不受TCR基因型的限制 有限稀释法(LDA) 用Tetramer法研究表明，外周血中仅有0.2-2.5% 的CD8+细胞对CMV和EBV特异 Tetramer法 Doherty PC.The numbers game for virus-specific CD8+T cells[J]. Science,1998,280:227 了解病毒特异性CTL和记忆性CTL方面的一项革命 检测病毒特异性CD8细胞的金标准(Gold Standard) Tetramer-应用 感染性疾病 HIV-AIDS, EBV, CMV, HPV, HBV, HCV, Influenza, Measles, Malaria, TB and RSV Breast, Prostate, Melanoma, Colon, Lung, Cervical, Ovarian and Leukemia Diabetes, Lyme disease, Multiple sclerosis, Rheumatoid arthr