第十八章疾病的病理学诊断和研究方法.pptx

;;;;重点难点;大体、组织和细胞病理学技术;主要运用肉眼或借助放大镜、量尺和磅秤等工具，观察被检物体的形状、大小、重量、色泽、质地、界限、表面及切面形态。; 将肉眼确定为病变的组织取材后，以福尔马林溶液固定和石蜡包埋制成组织切片，经不同的方法染色后用光学显微镜观察。; 采集脱落的细胞，自然分泌物、体液及排泄物中的细胞，以及通过细针穿刺所吸取的细胞，涂片染色后进行观察和诊断。;乳腺细针穿刺细胞学 显示乳腺纤维腺瘤细胞学改变（HE染色，400×）;病理学（第9版）;（四）液体活检技术;组织化学和免疫组织化学技术;（一）组织化学;肺组织隐球菌PAS染色 显示隐球菌荚膜（200×）;肝糖原PAS染色 肝细胞内糖原呈紫红色染色（400×）;肝组织罗丹宁染色 肝细胞内铜颗粒沉积呈橘红色（400×）; 免疫组织化学（IHC）和免疫细胞化学（ICC）是利用抗原-抗体的特异性结合反应以检测和定位组织或细胞中的某种化学物，由免疫学和组织化学相结合而形成。;1. IHC染色方法和检测系统 2. IHC染色的结果判读;A; ;电子显微镜技术;电子显微镜技术应用领域广泛： 胚胎及组织发生学的观察和研究 临床上多种疾病亚细胞结构病变的观察和诊断 一些疑难肿瘤的组织来源和细胞属性的判断 细胞凋亡的形态学观察 扫描电镜还可对样本进行三维形貌的细微显示和定量;显微切割技术;显微切割术（microdissection）是从组织切片或细胞涂片上的任一区域内切割下几百个、几十个某一特定的同类细胞群甚至单个细胞，再进行后续相关的研究，如PCR、PCR-SSCP及比较基因组杂交等。;激光扫描共聚焦显微技术;胶质瘤干细胞的分布和培养;核酸原位杂交技术; ;可以用直接法或间接法进行FISH。直接法FISH是以荧光素直接标记已知DNA探针，所检测的靶序列为DNA。间接法FISH是以非荧光标记物标记已知DNA探针，再桥连一个荧光标记的抗体，FISH的实验材料可以是间期细胞、分裂中期的染色体，也可以是冷冻或石蜡切片组织。;（四）ISH技术的应用; ;原位聚合酶链反应技术; 原位聚合酶链反应技术（in situ PCR）是将PCR的高效扩增与原位杂交的细胞及组织学定位相结合，在冷冻切片或石蜡包埋组织切片、细胞涂片或培养细胞爬片上检测和定位核酸的技术。;流式细胞术; ;（二）FCM的应用;图像采集和分析技术;（一）病理图像采集;（二）病理图像分析;比较基因组杂交技术;比较基因组杂交（comparative genomic hybridization，CGH）是近年来发展起来的一种分子细胞学技术，它通过单一的一次杂交可对某一肿瘤全基因组的染色体拷贝数量的变化进行检测。;生物芯片技术;　 基因芯片又称DNA芯片，是指将大量靶基因或寡核苷酸片段有序、高密度地排列在硅片、玻璃片、尼龙膜等载体上，形成DNA微点阵，即基因芯片。;（二）蛋白质芯片;组织芯片的特点是体积小、信息含量大，并可根据不同的需求进行组合，可高效、快速地进行各种组织学的原位研究和观察（如形态学、免疫组织化学、原位杂交等）并有较好的内对照及实验条件的可比性。;第二代测序技术;第二代DNA测序技术（NGS技术）是将基因组DNA随机打断成一定大小的小片段DNA，给后者加上不同的末端标记，最后通过桥式PCR、原位polony或微乳液PCR获得测序模板 NGS技术具有大规模、高通量、短时间、低成本等特点 ;二代测序技术流程图;生物信息学技术; ;人工智能技术;病理学（第9版）;疾病的病理学诊断包???活检、细胞学检查和尸检。 随着生物医学新技术的快速发展与广泛应用，除传统病理学技术外，许多新的先进技术手段已经应用在疾病的研究、病理学诊断和病理学教学中。