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中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色 原理:(钙钴法):碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中β甘油磷酸钠水解,产生磷酸钠。再依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化胺发生一系列反应,形成不溶性棕黑色的硫化钴,定位于酶活性之处。 中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色的临床意义 感染性疾病:作细菌性感染与病毒性感染的鉴别。 慢性粒细胞白血病的NAP严重减低,类白血病反应的NAP极度增高。 急性粒细胞白血病时NAP积分减低,急性淋巴细胞白血病的NAP积分多增高,急性单核细胞白血病时一般正常或减低。 再障时NAP活性增高,PNH时活性减低可鉴别。 其他血液病:恶组减低。 腺垂体或肾上腺皮质功能亢进等NAP积分可增高。 糖原染色(PAS) 原理:过碘酸能将血细胞内的糖原氧化,生成醛基,醛基与Schiff液中的无色品红结合,形成紫红色化合物,定位与细胞质中。 PAS染色的临床意义: 幼红细胞出现PAS强阳性反应可见于红血病和红白血病,有助于与其他红细胞系统疾病的鉴别。也可见于部分严重缺铁性贫血,重型地中海及巨幼细胞贫血。 急性粒细胞白血病细胞PAS反应阴性或弱阳性反应,常呈细颗粒状或均匀淡红色;急性单核细胞白血病细胞PAS反应呈弥漫性阳性而胞质边缘或伪足处阳性颗粒稍粗;急性淋巴细胞白血病的PAS反应呈粗颗粒,甚至大块状。 其他 可识别不典型巨核细胞、区分高雪细胞(阳性)与尼曼—皮克细胞、鉴别腺癌细胞等。 铁染色 原理:细胞中的铁在酸性条件下与低铁氰化钾溶液反应,生成蓝色的铁氰化钾(普鲁士蓝),定位与含铁的部位。 铁染色临床意义: 缺铁性贫血时,细胞外、内铁依次减少 非缺铁性贫血时,细胞外铁多增高 铁粒幼贫血时,铁粒幼细胞增多,出现环状铁粒幼细胞。 骨髓细胞免疫表型分析 意义: 1、有助于白血病亚型的诊断,特别对用形态学、细胞 化学染色不能肯定细胞来源时及杂合性白血病; 2、指导临床治疗; 3、有助于判断白血病的预后; 4、可进行疾病的监测如MRD检测。 Flow Cytometry Immunohistochemistry 各型白血病免疫学鉴别 类型 CD10 CD19 CD22 TdT HLA-DR CD3 CD7 CD13 CD33 MPO B- 淋 + +/- +/- + + - - - - - T- 淋 - - - + - +/- +/- - - - 急非淋 - - - - + - - +/- +/- + 骨髓病理学检查 适应症: 再生障碍性贫血 骨髓增生异常综合征、 骨髓纤维化、 低增生性白血病、 骨髓转移癌, 多发性骨髓瘤。 骨髓细胞学检查是诊断血液疾病的重要手段之一.涂片所显示的细胞结构清晰,观察形态较理想,但亦有其局限性,如: 骨髓增生极度活跃的疾病(慢性粒细胞自血病、骨髓转移癌等),骨髓内细胞相互粘连,易发生干抽; 而骨髓纤维化等疾病骨髓内容物少,骨髓组织被纤维组织代替,骨髓涂片镜下见不到造血细胞和组织,无法分析诊断; 穿刺抽吸由于负压及血窦的破坏,发生造血细胞的稀释,亦无法分析诊断结果; 若穿刺部位为局灶性增生部位,则不能反映造血组织的全貌,造成临床诊断的失误。 常见血液病的细胞学诊断 贫血: 再障(aplaatic anemia,AA) 缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA) 巨幼贫(megalobastic anemia,MA) 溶贫(hemolysis anemia,HA) 白血病(leukemia) 急性白血病(acute leukemia,AL) 慢性白血病(chronic leukemia,CL) 骨髓增生异常综合症(myelodyplastic syndrome,MDS) 多发性骨髓瘤( multip
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