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酶工程简介　 一、酶工程的定义及分类 “酶工程”是指酶制剂在工业上的大规模生产及应用。 虽然现在世界上已发现和鉴定的酶有4000种以上。但是由于分离和提纯酶的技术比较复杂、繁琐，因而酶制剂的成本高，价格贵，不利于广泛应用。所以，到目前为止，投入大规模生产和应用的商品酶只有16种，小批量生产的商品酶也只有几百种。为了解决这个问题，人们把对自然酶的注意力转向对自然酶进行适当的加工与改造。根据研究和解决问题的手段不同，为求得大规模生产及应用酶而应运而生的酶工程可以分为两大类：化学酶工程和生物酶工程。 二、化学酶工程 化学酶工程亦可称为初级酶工程(Primary enzyme engineering)，它主要由酶学与化学工程技术相互结合而形成。 通过化学修饰、固定化处理、甚至通过化学合成法等手段，改善酶的性质以提高催化效率及降低成本。它包括自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究和应用。 食品工业、制药工业、制革工业、酿造工业及纺织工业使用酶制剂后可以大大地改造、革新工艺流程并降低成本。主要使用自然酶，多数使用微生物来源的酶的粗制剂。 医学上进行治疗以及基础酶学研究要求纯度高、性能稳定、治疗上还需要低或无免疫原性，所以常常对纯酶进行化学修饰以改善酶的性能。如抗白血病药物天冬酞胺酶的游离氨基经过脱氨基作用，酰化反应或羰工亚胺反应进行修饰后，该酶在血浆中的稳定性得到很大的提高；人的α-半乳糖苷酶A经交联反应修饰后，酶活性比自然酶稳定；酶与聚乙二醇、多糖、某些蛋白质结合后酶的性质亦可得到改善，α淀粉酶与葡聚糖结合后，热稳定性显著增加，该自然酶的半寿期只有2.5分钟，结合酶则为63分钟。 固定化酶是指被结合到特定的支持物上并能发挥作用的一类酶，是化学酶工程中具有强大生命力的主干。它在应用上和理论上的巨大潜力吸引了生物化学、微生物学、医学、化学工程，高分子等各个领域的科研机构及企业科技部门的研究人员的注意力。酶的固定化技术包括吸附、交联、共价结合及包埋等四种方法。固定化酶的优点是(1)可以用离心法或过滤法很容易地将酶与反应液分离开来，在生产中十分方便有利；(2)可以反复使用，在某些情况下甚至可以使用达千次以上，可极大地节约成本；(3)稳定性能好。国外工业上已制备固定化氨基酰化酶用以分析D、L型氨基酸；已把烯烃转变成石油化学产品的重要原料——环氧烃类；已用固定化的葡萄糖异构酶生产高果糖玉米糖浆。近年来国内已用固定化酶技术半合成新青霉素、生产高果糖糖浆以及增产啤酒等。60年代以来，人们还制造出带有固定化酶的各种电极用来检测和调节体液中代谢物的浓度。其中应用的电极部分包括各种离子电极、氧电极及二氧化碳电极等这样的电极称为酶电极，酶电极兼有酶的专一性、灵敏性及电位测定的简单性的双重优点，目前已有20多种固定化酶用于酶电极中。模拟生物体内的多酶体系，将完成某一组反应的多种酶和辅助因子固定化，可以制成特定的反应器。高效、专一、实用的生物反应器可通过将含酶的微生物、细胞，细胞器固定化而制得。近年来，以固定化微生物组成的生物反应器已获工业应用。生物反应器的研究不仅具有使生物工业革新的实际意义，而且对推进生物化学、细胞生物学、生理学，仿生学等基础生物科学的研究具有重要的理论意义。 以上化学修饰酶和固定化酶都是在自然酶的基本结构上加以一些改变，从而改善酶在工业及医学上的应用。近年来，有许多科学家模拟酶的生物催化功能，用化学半合成法或化学全合成法合成了称之为人工酶(artificial enzyme)的催化剂。例如用电子传递催化剂[Ru(NH3)5]3+与巨头鲸肌红蛋白结合，产生一种“半合成的无机生物酶”，这样就把能与O2结合，无催化功能的肌红蛋白转变成能氧化各种有机物(如抗坏血酸)的半合成酶了，它接近于天然的抗坏血酸氧化酶的催化效率。全合成酶不是蛋白质，而是小分子有机物，它们掺入到酶的催化基团并控制酶的空间构象，从而像自然酶那样专一性地催化化学反应。例如，由环糊精制成的人工转氨酶能催化α-酮酸与磷酸吡哆胺专一性地合成氨基酸。目前，这类全合成的人工酶因为催化效率很低，还并不具有实用价值。 三、生物酶工程 生物酶工程是在化学酶工程基础上发展起来的，是以酶学和DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物。因此它亦可称为高级酶工程(advanced enzyme engineering)。 自从70年代初DNA重组技术问世以来，把酶学推进到一个十分重要的发展时期，使它的基础研究和应用研究领域发生着巨大的革命性变化，产生了生物酶工程。 生物酶工程主要包括三个方面：(1)用DNA重组技术(即基因工程技术)大量地生产酶(克隆酶)；(2)对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶(突变酶)；(3)设计新的酶基因，合成自然界不曾有过的、性能稳定、催化效率更高的新酶。 酶基因的克