探究培养中酵母菌种群数量的动态变化.pptVIP

LOGO 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 一、实验目的 1.探究酵母菌种群动态变化的规律。 2.掌握酵母菌数量的测定方法。 二、实验原理 1.生活在一定自然区域内的同种生物个体的总和称为种群。种群随着环境条件的变化而改变，处于动态变化中。 2.在理想条件下，种群数量增长为“J”型曲线；在环境阻力存在下，种群数量增长为“S”型曲线。 种群数量增长曲线：以时间为横坐标，以种群数量的对数为纵坐标绘制的曲线。 3.用微生物探究种群的变化规律，方便、快捷。 4.酵母菌个体大，便于观察和计数。 酵母菌的特点： 酵母菌细胞多呈圆形、卵圆形，有的呈分支的菌丝状。繁殖方式以无性繁殖中的出芽生殖为主，少数为分裂方式繁殖；有性繁殖是通过不同遗传性的细胞接合产生子囊孢子的方式进行。酵母菌有2倍体和单倍体世代，生长中用的是其2倍体。酵母菌为兼性厌氧菌，在有氧的情况下，进行繁殖，无氧条件下，进行厌氧发酵产生乙醇。酵母菌的时代时间为60分钟。 5. 微生物计数 微生物计数的方法主要有显微直接计数法、比浊法和活菌计数法。 显微镜直接计数是通过测定血细胞计数板的计数室内微生物细胞的数量来进行快速计数。优点：计数方便快捷；缺点：不能区别死活 细胞。 每一个大方格边长为1mm，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度0.1mm，所以计数室的容积为0.1mm3。 菌浓度= （A/5）x 25 /10-4 = （A/5）x 25 x 10000 x B = 50000 x A x B（个/mL） -25 x 16型 菌浓度=（A’/4）x 16 x 10000 x B = 40000 x A x B（个/mL） -16 x 25型 A:五个中格的总菌数，B：稀释倍数。 酵母菌（发酵粉），液体PDA培养基（或一定浓度的葡萄糖溶液），显微镜，血细胞计数板，盖玻片，接种环。 四、实验步骤 1.配制马铃薯葡萄糖培养基 取去皮切成块的马铃薯200g，放入装有1000mL自来水的烧杯中，加热煮沸20min，用4层纱布过滤，在滤液中加入葡萄糖20g补充自来水至1000mL，pH自然。将配制好的培养基分装到锥形瓶中，装量为容器容积的1/5。 三、实验材料 2.灭菌 1mL吸头放入吸头盒中用牛皮纸或报纸包扎后，同分装好的培养基一起放入高压灭菌锅内，121 ℃，灭菌20 min。 3.接种及培养 按3%接种量接种酵母菌培养液（或者1g干酵母粉接入100mLPDA 培养基中）30℃ ～32℃180转/min (180rpm) 培养18～24 h。 4.取样计数 在培养过程中每隔2小时，无菌取样1mL进行显微计数。如果菌数过多进行10倍稀释后，进行计数。 也可以将培养基分装到试管中，分别接种，培养，每隔2h取一管，进行计数。 5.计数 先在显微镜下观察计数板的规格。 1）加样 将盖玻片放在计数板的计数室上。 酵母菌稀释液混匀，吸取少量稀释液，从计数板一侧中间平台与盖玻片接触的边缘处加样，略微倾斜，让菌液自行渗入并充满上下计数室。 (2) 定位计数室 先在低倍镜下寻找计数板大方格网的位置，转换高倍镜后，再将计数室一角的中格移至视野中，顺着大方格线移动计数板，使计数室位于视野中间。 (3) 计数 计数时，使用规格为25 x 16型的计数板，选取左上、右上、左下、右下和中央的5个中方格进行计数，填表。 注意事项： 6. 绘制动态变化曲线 以时间为横坐标，菌数的对数为纵坐标，绘制曲线。 思考：可改变酵母菌的生长条件探究不同环境阻力下，酵母菌动态变化曲线的不同。 网上设计的实验培养7天，每天取样是不科学的。 LOGO 网上设计的实验培养7天，每天取样是不科学的。