没食子酸与牛血红蛋白相互作用的研究-生物技术进展.PDF

生物技术进展 ２０１９年　 第９卷　 第１期　 ５４~６１ 研究论文 Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　 ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１ Ａｒｔｉｃｌｅｓ 没食子酸与牛血红蛋白相互作用的研究 １ꎬ２ １ꎬ２ １∗ ２∗ ２ꎬ３ 施沈佳 ꎬ　 李剑瑛 ꎬ　 黎中宝 ꎬ　 陈俊德 ꎬ　 吴坤远 １.集美大学水产学院ꎬ福建 厦门３６１０２１ꎻ ２.国家海洋局第三海洋研究所ꎬ国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术中心ꎬ福建 厦门３６１００５ꎻ ３.福建农林大学食品科学学院ꎬ福州 ３５０００２ 摘　 要: 牛血红蛋白(ｂｏｖｉｎｅ ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎꎬＢＨｂ)与人血红蛋白高度同源ꎬ且易获得ꎬ常用于血红蛋白与小分子化合物结合 的研究ꎮ 没食子酸(ｇａｌｌｉｃ ａｃｉｄꎬＧＡ)作为一种多酚类小分子化合物ꎬ可被用作小分子药物模型ꎬ研究其与ＢＨｂ 的相互作 － 用ꎬ可为其在医药领域的应用提供理论依据ꎮ 运用紫外 可见光谱(ＵＶ￣ｖｉｓ ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ)、荧光光谱(ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ)、傅里叶变换红外(Ｆｏｕｒｉｅｒ ｔｒａｎｓｆｏｒｍ ｉｎｆｒａｒｅｄꎬＦＴＩＲ)光谱、圆二色光谱(ｃｉｒｃｕｌａｒ ｄｉｃｈｒｏｉｓｍꎬＣＤ)等手段ꎬ在 － ｐＨ７.０条件下ꎬ研究ＧＡ 与ＢＨｂ 的相互作用ꎮ 紫外 可见光谱的结果表明ꎬＧＡ对ＢＨｂ 的氧合状态没有影响ꎬ不会使氧合 血红蛋白脱氧ꎮ 结合荧光光谱和相关公式计算结果可知ꎬＧＡ 与ＢＨｂ相互作用发生了荧光猝灭ꎬ且猝灭常数随着温度的 升高而增大ꎬ说明ＧＡ 与ＢＨｂ相互作用的猝灭类型为动态猝灭ꎻ通过计算得到了不同温度下ＧＡ 与ＢＨｂ相互作用的结合 ２９８ ３ ３０８ ３ ＝ × ＝ × 常数ꎬ分别为Ｋ ７.９４１ １０ Ｌ/ ｍｏｌꎬＫａ ａ １０.４７８ １０ Ｌ/ ｍｏｌꎻＧＡ 与ＢＨｂ之间主要靠疏水作用力结合ꎬ可自发发生反应ꎻ 色氨酸和酪氨酸残基所处微环境受到扰动ꎬ色氨酸残基的荧光吸收峰强度比酪氨酸残基变化大ꎬ表明ＧＡ 与ＢＨｂ分子的 结合位点更接近于色氨酸残基ꎮ ＦＴＩＲ光谱和ＣＤ 的检测结果显示ꎬ与ＧＡ 作用前后ꎬＢＨｂ 均以α￣螺旋结构为主ꎬ即ＧＡ 对ＢＨｂ分子的二级结构影响较小ꎮ 关键词: 没食子酸ꎻ牛血红蛋白ꎻ相互作用ꎻ光谱测定 ＤＯＩ:１０.１９５８６/ｊ.２０９５￣２３４１.２０１８.０１０３ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ Ｂｅｔｗｅｅｎ Ｇａｌｌｉｃ Ａｃｉｄ ａｎｄ Ｂｏｖｉｎｅ Ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ １ꎬ２ １ꎬ２ １∗ ２∗ ２ꎬ３ ＳＨＩ Ｓｈｅｎｊｉａ ꎬＬＩ Ｊｉａｎｙｉｎｇ ꎬＬＩ Ｚｈｏｎｇｂａｏ ꎬＣＨＥＮＪｕｎｄｅ ꎬＷＵ Ｋｕｎｙｕａｎ １.Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ ＣｏｌｌｅｇｅꎬＪｉｍｅｉ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＦｕｊｉａｎＸｉａｍｅｎ ３６１０２１ꎬＣｈｉｎａꎻ ２.Ｍａｒｉｎｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｔａｔｅ Ｏｃｅａ