使用可靠的方法却得到不一致的结果-医药生物技术国家重点.PDFVIP

使用可靠的实验 方法，却得到 不一致的结果？ 您的样品中有杂质 ? 盐浓度、pH 值或缓冲液影响了您的 蛋白吗 您是否使用了 protocol 中要求的足 量的样品 蛋白还存在于您的样品中吗 也许您的样品没有得到妥善的储存 您的蛋白还有活性吗 您这一批次的蛋白和上一批次的品质 一致吗 鉴定蛋白的品质 (protein quality)- 即蛋白品控 - 包括确认蛋白是否存在，样品的纯度，检测蛋白 的浓度， 以确保您在实验中蛋白的使用量是正确 的。此外，怎样才能认定您的样品具有生物活性呢？ 通过检测蛋白是否与其他分子相互作用，来进一 步判定蛋白的品质 (protein quality)，最终让您确 即使是遵循相同的实验 protocol，但只有高品质 定样品是有功能的。 的样品才是我们实验成功的关键，才能确保我们 得到一致性的实验结果。 最后，通过比对新鲜制备的和之前的蛋白，来进 一步了解其品质，以确保您在实验中使用的是相 只有您掌握更全面的蛋白品质信息⸺蛋白是否 同品质的样品。 存在 , 纯度 , 浓度 , 结构的完整性 , 批次间品质的 相似程度，以及其功能⸺您才可以做出更好的 决定：是否继续使用该样品进行下一步的实验。 在您开始实验以及实验中的关键步骤之前，只有 检测蛋白的品质 (protein quality)，确保您使用 鉴定蛋白质量的最好方法是 的 是 高 品 质 的 样 品，再 按 照 之 前 的 实 验 什么？ protocol，您才能得到一致的实验结果。 在此 , 您将了解到蛋白品质 (protein quality) 及如 何对其进行评估的细节。 如果您有兴趣了解帮助您检测蛋白品质的技术， 请关注 Tycho 相关信息。 蛋白的品质 (protein quality) 是一个内涵丰富的 概念。一个高品质的样品意味着结构上是完整的， 正确折叠的，并且没有受到其他污染。这些信息 都会让我们对自己的蛋白样品更加自信。 不同批次的对比 您使用的蛋白有多种渠道来源⸺自己制备的， 购买的商用蛋白，或接手别人的蛋白。 通常您认为样品的品质是没问题的。您可能甚至 不知道您购买或制备的蛋白与之前使用的批次是 否相似。您也没有办法很容易地验证所接手的样 品品质是否良好。 直到完成了一个漫长的实验，您才发现实验出了 Tycho 会告诉您不同批次样品的 问题。 品质是否一致 随后就需要对问题进行枯燥的、漫无目的的排 查。也许您在 SDS上只能找到一个弥散的 条带，或无法在 Western 上看到一个目的条带， 也许 ELISA 无结果，或在结合实验中看不到相互 作用，这很让人沮丧。 对您来说，蛋白样品是很珍贵的。付出这么多时 间和努力，您能确定纯化