全自动凝胶净化系统的研制及食用油中增塑剂检测的应用.doc

全自动凝胶净化系统的研制及食用油中增塑剂检测的应用 李琳* 马忠强 田春明 胡克 （莱伯泰科仪器有限公司 北京 101312） 摘要：介绍了凝胶渗透色谱GPC Cleanup800的结构和性能。利用该仪器系统对食用油进行净化处理，建立了食用油中邻苯二甲酸辛酯的净化方法和高效液相色谱的分析方法，结果表明系统运行稳定，方法简单易行，对食用油中油脂的去除有较好的效果。 关键词：凝胶净化系统；HPLC；邻苯二甲酸辛酯 引言： 凝胶渗透色谱其原理是按照分子尺寸大小在多孔物质上进行分离。可将脂肪，色素等高分子化合物和所需的小分子化合物进行分离，凝胶净化作为一种样品纯化的有力手段在国外有广泛的应用，如USEPA3640A[1]和AOAC肉制品前处理方法[2]。随着对食品安全的日益重视，凝胶渗透色谱也得到了越来越广泛的应用，而且在一些农药检测上也被列入国家标准[3]。 目前，国内自主研发生产凝胶净化系统的厂商屈指可数，早在2005年，LabTech承担了“十五”国家重点科技攻关计划“凝胶渗透色谱装置”项目[4]，研制的GPC Cleanup600型凝胶渗透色谱得到了成功验收。在此基础上经过近3年的不断设计、改进、更新，LabTech新一代凝胶渗透色谱Cleanup800型全自动凝胶渗透色谱全面面向市场，随即也得到了用户的认可。Cleanup800型全自动凝胶渗透色谱为样品的全自动处理提供了强有力的工具。 邻苯二甲酸二甲酸酯类化合物是一类环境激素，它具有生殖毒性、会导致生物繁殖能力下降和生殖器官畸形等。其用途主要是作为增塑剂，用于塑料制品、橡胶、涂料、印染、化妆品等的生产过程中。目前食用油多数是使用塑料容器包装，因而塑料包装中的邻苯二甲酸二甲酸酯类化合物与食用油接触会溶出，对人体造成伤害。食用油中大量的油脂存在无法直接进行这类化合物的分析，有文章报道使用Florisil进行前处理后进行分析[5]，但有自动化程度差，处理能力有限的缺点。本文使用Labtech自主研发的Cleanup800型全自动凝胶渗透色谱净化处理食用油，并使用Labtech二元高压液相色谱建立了邻苯二甲酸二甲酸辛酯的液相色谱分析方法，得到了良好的结果。 仪器介绍 GPC 800 凝胶净化系统由高压恒流输液泵，可变波长紫外检测器，自动液体处理器组成。可以实现样品的自动进样，净化和目标组分的收集等一系列功能。 高压恒流输液泵最大耐压可达到42MPa，最大流速可达49.99ml/min，能够满足各种进样量对流速的要求。 可变波长紫外检测器波长范围为190nm-600nm，在此波长范围能大部分有机物质都有吸收，与单一波长检测器相比可以更准确的监测色谱流出物的状态，使得样品的净化更加准确。 自动液体处理器可以实现X-Y-Z三维运动，定位准确，重复性好。自动液体处理器可以同时实现样品进样，进样针及管路清洗，组分收集功能。同时自动液体收集器控制部分由 作者简介：李琳，女，硕士，Email：lli@ 三支电磁阀组成，实现废液、馏分、干净溶剂的任意切换，对未检测出信号的干净溶剂进行回收，节约溶剂，减少对环境的污染。自动液体处理器具有隔膜穿刺功能，从而有效保证样品在净化过程中不发生变化，同时保证溶剂不会挥发到环境当中，保护操作者安全。 系统集成时间、峰、电压多种组分收集方式，用户可以根据应用需求选择适合的收集方式，方便的实现复杂样品的净化功能。 凝胶净化柱填料参照EPA3640推荐的BioBreads SX-3凝胶，粒径200－400目，柱管为不锈钢柱管[6]。 实验部分 2.1仪器及设备 GPC Cleanup800凝胶净化系统装置（LabTech公司）；LC600二元高压液相色谱系统（LabTech公司）；旋转蒸发仪EV311（LabTech公司）。电子天平（精确到0.0001g，Sartorious）Milipore纯水机。 凝胶净化柱：20×300mm，200-400目，（LabTech公司）；色谱柱：XB-C18 4.6×150mm，5um。 2.2试剂和标样 二氯甲烷（分析纯），甲醇（色谱纯），超纯水。 邻苯二甲酸二辛酯（ 北京化学试剂公司） 2.3标准样品的配制 以甲醇配制邻苯二甲酸二辛酯标准贮备液1mg/ml，在以甲醇配置适当浓度的标准工作溶液。 2.4 样品制备 称取超市售食用油0.5g置25ml容量瓶中，以二氯甲烷溶解定容，备用。 2.5 GPC净化条件 流动相：二氯甲烷；检测波长：254nm；流速：3ml/min；进样量5ml。 2.6色谱条件 流动相：A：甲醇，B：水；流速：1ml/min，检测波长：227nm 表1 梯度洗脱程序 时间（min） A(%) B（%） 0:00 95 5 10:00 100 0 12:00 1