微生物学通报滇池中溶藻细菌的分离鉴定及其溶藻效应-微生物学报.PDF

微生物学通报 Dec. 20, 2018, 45(12): 2614−2623 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.180028 研究报告 滇池中溶藻细菌的分离鉴定及其溶藻效应 王琪 Paulina Simon 刘锦钰 迟玉新 代先祝 杜红霞 张晓辉 * * 五十岚泰夫 杨彩云 罗锋 ( 400715) 摘 要：【背景】藻类水华或赤潮在世界范围内频发，带来各种危害，亟需找到有效途径控制 水华或赤潮。溶藻细菌具有杀死藻类控制藻类生物量的能力，可以作为防治水华和赤潮的有效 工具。【目的】分离并鉴定滇池中的铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)及其溶藻细菌，对溶藻 菌作用于铜绿微囊藻的溶藻效应进行研究，初步了解其溶藻特性与溶藻机制。【方法】采用LB 平板稀释涂布，再经多次划线分离纯化细菌，测定 16S rRNA 基因序列以鉴定细菌种类；采 用毛细管分离的方法分离铜绿微囊藻，并测定其cpcBA 基因序列以鉴定蓝藻种类；采用热乙 醇法提取叶绿素 a ，从而计算溶藻效率；基于过氧化氢酶(CAT) 、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙 二醛(MDA)探究藻细胞在溶藻菌处理下的抗氧化系统响应。【结果】共分离获得 11 株微囊藻 和 17 株针对铜绿微囊藻的高效溶藻菌。选取其中一株生长速度最快的铜绿微囊藻DCM4 和一 株溶藻效果最好的溶藻菌 Sp37 (Bacillus siamensis)进行后续研究。Sp37 对DCM4 的4 d 溶藻率 达到92.4%±1.5% ，且对微囊藻属的水华微囊藻(M . flos-aquae)和惠氏微囊藻(M . wesenbergii)均 有溶藻效果，而对绿藻没有溶藻效果。Sp37 的原菌液和无菌滤液对DCM4 的4 d 溶藻率分别 为 86.8%±4.3%和 81.1%±2.2% ，两者没有显著差异(P0.05) 。Sp37 菌体对 DCM4 的溶藻率为 25.4%±7.3% 。Sp37 无菌滤液经不同温度和pH 处理之后的溶藻率与未经处理的无菌滤液的溶藻 率无明显差异。Sp37 无菌滤液处理藻细胞会使藻细胞的CAT 、GSH 和MDA 含量发生变化。【结 论】菌株Sp37 对铜绿微囊藻DCM4 具有高效的溶藻作用，而且对微囊藻属具有一定的溶藻特 异性。Sp37 是通过分泌胞外物质间接溶藻，且溶藻物质具有热稳定性和酸碱稳定性。Sp37 无 菌滤液处理藻细胞会触发藻细胞抗氧化系统，并且会损伤藻细胞膜。Sp37 无菌滤液很可能是 通过对藻细胞造成氧化胁迫，最终导致藻细胞死亡的。 Foundation items: National Natural Science Foundation of China ; Chongqing Postdoctoral Science Foundation (Xm2016082); Chongqing Research Program of Advanced Technology and Application Foundation (cstc2016jcyjA0525); Chongqing Research Funds of Scientific Platform and Base Construction (cstc2014pt-sy0017)