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第 28 卷 第 28 期 中国现代医学杂志 Vol. 28 No.28
2018 年 10 月 China Journal of Modern Medicine Oct. 2018
DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2018.28.006
文章编号： 1005-8982（2018）28-0033-06
临床研究·论著
细胞因子预处理对体外扩增 NK 细胞活性的影响 *
申重阳 ，幸倚帆 ，谭小虎 ，陈勇军1 2 2 2
（1. 成都中医药大学 基础医学院，四川 成都 611137 ；2. 成都康景生物科技有限公司，
四川 成都 611130）
摘要 ：目的 采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血单个核细胞（PBMCs）进行自然杀伤细胞（NK）的
扩增培养，培养过程中白细胞介素IL-2、IL-12、IL-15、IL-18以不同组合及不同方式添加，探究体外培养
NK细胞的细胞因子最佳组合和添加方式。方法 根据细胞因子组合及添加方式的不同，将NK培养分为3组。
A组：IL-2+IL-15组，B组：IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组，C组：IL-12+IL-15+IL-18预处理/IL-2组。
培养过程中第7天和第14天分别取样统计各组细胞因子培养后的细胞数量，并使用流式细胞仪检测NK细胞
表面分子表达；将NK细胞与K562细胞共培养，然后ELISA测定NK细胞的IFNγ释放量，CSFE/7-AAD法
检测NK细胞的杀伤活性。结果 3组不同的培养方式所得细胞的扩增倍数差异无统计学意义，随着培养时间的
增加，NK细胞的比例也逐渐上升，3组间NK细胞比例差异无统计学意义（P 0.05）。NK细胞表面CD25（IL-2Rα）
的表达情况比较，差异有统计学意义（P 0.05），C组的阳性率高于A和B组。IFN-γ的释放量和NK细胞的
体外杀伤活性一致，均为C组高于A和B组。对肿瘤患者的NK细胞，C组的细胞因子添加方式也能很好的进
- +
行扩增（CD3 CD56 细胞比例大于50%）。结论 C组中的细胞因子预处理方式能够高效扩增NK细胞，与A
或B组联合添加的方式比较，该方式能显著激活NK细胞的杀伤活性。
关键词 ： 外周血单个核细胞；自然杀伤细胞；细胞因子预处理
中图分类号 ： R392.12 文献标识码 ： A
Pretreatment with cytokines promotes cytotoxic activity of NK cells*
1 2 2 2
Chong-yang Shen , Yi-fan Xing , Xiao-hu Tan , Yong-jun Chen
(1. School of Basic Medical Sciences, Chengd
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