黑素转铁蛋白在家兔网织红细胞膜上的表达及其在铁摄取中的-Core.PDFVIP

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2019-04-06 发布于天津
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黑素转铁蛋白在家兔网织红细胞膜上的表达及其在铁摄取中的-Core.PDF

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DO I :10.13459/j .cnki .cj ap.2001.04.018 356 Chin J A ppl Physiol 200 1;17(4) ＊ 1 2 1 陈文芳, 钱忠明, 谢俊霞 (1., 266021;2., ) :研究黑素转铁蛋白(p97)在家兔网织红细胞膜上的表达及在非转铁蛋白结合铁摄取中的作用。: 59 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS=PAGE)和放射性同位素法(Fe)。:①网织红细胞孵育液浓缩后, 经SDS测定,在分子量97kD 位置上可见一条明显的蛋白带;用磷脂酚肌醇磷脂酶 C (PI-PLC)300 mu/ml 预处理网织红细胞后, 孵育液浓缩再经SDS测定, 在分子量97kD 处仍有一条明显的蛋白带, 且平均OD 值高于未经处理的网织红细胞;而成熟的红细胞在此处却没有明显的蛋白带。②单纯用 PI-PLC 作用于网织红细胞, 铁摄取无明显变化(P0.05)。③去除内源性转铁蛋白后, 再用PI-PLC 作用网织红细胞, 则胞浆内铁及整合到血红素中的铁均较未经处理的网织红细胞明显降低(P0.05 )。:p97 可能存在于家兔网织红细胞膜上, 且在摄取非转铁蛋白结合铁的过程中可能发挥作用。 :　黑素转铁蛋白;　聚丙烯酚胺凝胶电泳;　非转铁蛋白结合铁;　网织红细胞 :Q26 :A :1000-6834 (2001)04-0356-04 　　(melano ransferrin )p97, ml,0 .15 mol/L NaCl 3 , [1,2] , ,4 ℃2000 g 。p97 30 min,1/4 , 。, 78%～84.5%, PBS , -(GPI ); 11%～17 %。 p97 , , 。 GPI 。 ,, 1/4 、、、、 PBS ,11%～17 %。 p97, p97 1.3　 8 , p97 , 2×10 PI 0.5 ml 。 (pH7.4)0.5 ml PI-PLC (300 mu/ml) p97 p97 (pH 7.4),30 ℃ 30 min, 。。2 000 g 30 min,, 0.2 p97 , μm , Cen ricon-10 7 SDS, 8 ,p97 PAGE 。2×10 0.5 ml 。 (pH7.4 ),。 7 10% 1　 (), 1.1 　 0.1%R250 30 ～40 59 Fe (FeCI )Amersham , min,40% 10% 3 518.13mCi/mmo 1;pI-PLC Sigma ; 1 ～3 h,。 Bio-Rad ; 1.4　