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辽宁省科技攻关层次计划（JH2） 项目“虾夷扇贝大规模死亡致病病原分离鉴定及‘ 褐色沉积病’形成机制研究”可行性研究报告 一、 项目提出的目的及意义； (1) 病害是虾夷扇贝大规模死亡的主要直接原因 我国从上世纪 80 年代初从日本引进虾夷扇贝，经过近 20 年科学研究和生产实践，在苗种繁育、筏式养殖、底播养殖和扇贝采捕技术等方面取得了关键性的突破，在我国黄海北部形成规模化和产业化养殖，我省长海县海域迅速发展成为我国虾夷扇贝增养殖最主要海区。然而2007年至今，该海区筏养二龄虾夷扇贝已经连续十年发生大规模死亡，每年造成约2亿人民币的经济损失，严重影响人民群众收入和社会经济发展。 针对扇贝死亡，许多学者从海区环境、养殖密度、遗传育种等角度做出分析，但缺乏持续深入的研究。申请人所在项目组2008年至今持续对长海县筏养虾夷扇贝大规模死亡开展相关研究，从流行病学、病原学、免疫学、遗传育种和养殖密度等多个角度展开分析，经过多年流行病学调查和相关实验，我们发现筏养虾夷扇贝大规模死亡具有周期性，有典型发病症状，感染区域广，相关实验表明、水温、养殖密度等影响因子与虾夷扇贝大规模死亡密切相关，但病害是虾夷扇贝大规模死亡的主要直接原因(文章待发)。 (2) 导致筏养虾夷扇贝大规模死亡的致病病原没有探明 长海县筏养二龄虾夷扇贝大规模死亡已经持续9年，导致二龄虾夷扇贝筏式养殖产业的规模急剧萎缩，养殖企业和个体户纷纷转型养殖当年苗种和一龄扇贝。这种养殖模式和二龄虾夷扇贝养殖相比利润低，且导致种贝规模和质量严重下降，进一步影响育苗，最终可能导致整个产业的下滑。因此，探明二龄虾夷扇贝大规模死亡的原因并解决问题对于产业可持续发展具有重要意义，而分离鉴定致病病原探明原因解决问题的科学基础和重要环节。许多学者对此进行过一定研究，国家海洋环境监测中心在虾夷扇贝闭壳肌组织内发现交替假单胞菌属(Pseudoalteromonas sp)并认为其是导致虾夷扇贝出现脓胞的主要致病病原；申请人所在项目组在虾夷扇贝闭壳肌脓胞中同样分离出一株具有致病性的细菌，经鉴定为查氏弧菌(Vibrio chagasii)(1);也有学者从闭壳肌脓胞中分离出灿烂弧菌(Vibrio splendidus)(2),并认为有一定的致病性。这些研究均从扇贝闭壳肌脓胞中分离出病原菌，但结论有很大差异，并且存在一定争议。闭壳肌脓胞是单一病原感染还是多种病原共同感染？闭壳肌出现脓胞是否是导致虾夷扇贝大规模死亡的唯一原因？这些问题也都没有得到有效解决，因此导致筏养虾夷扇贝大规模死亡的致病病原需要全面深入的进行系统研究，具有重要科学意义，对于产业现状也有重要意义。 参考文献 (1) 滕炜鸣, 李文姬, 张明,等. 虾夷扇贝脓胞病病原的分离、鉴定与致病性[J]. 水产学报, 2012, 36(6):937-943. (2) Rui Liu, Limei Qiu, Zuoan Yu, et al. Identification and characterisation of pathogenic Vibrio splendidus from Yseeo scallop(Patinopecten yessoensis) cultrued in a low temperature environment[J]. Journal of Invertebrate Pathology, 2013, 114:144-150 (3) 虾夷扇贝闭壳肌出现脓胞可能不是大规模死亡的唯一症状 连续多年流行病学调查发现，闭壳肌出现脓胞是筏养二龄虾夷扇贝大规模死亡的典型发病症状，得到学者一致认可。然而申请人通过海区调查和室内模拟实验表明，外套膜颜色发黄和贝壳内侧出现褐色沉积可能也是虾夷扇贝大规模死亡的典型症状。贝壳内侧出现褐色沉积有学者认为可能是扇贝互相碰撞导致外套膜受损，在恢复过程中分泌的物质。因此多年来对此症状一直没有进行研究。2016年海区调查和室内模拟实验过程中，申请人发现实验中所有死亡扇贝内壳均有褐色沉积，存活下来但状态不好的扇贝在贝壳内侧也存在褐色沉积；而根据海区调查结果，外套膜发黄的扇贝在海区死亡率很高。因此，外套膜发黄且贝壳内侧有褐色沉积很可能不是由于机械损伤导致，而是由于病原感染产生的典型症状，和虾夷扇贝大规模死亡相关性很大，有必要对其产生原因及可能致病病原进行相关研究，国内外对此也很少有相关研究。 二、 与项目相关的国内外发展概况及市场需求分析； 海洋贝类病害研究最早见于1919年，Danglade在牡蛎体内发现一种寄生性蠕虫(3)。20世纪40年代，墨西哥湾养殖区的牡蛎大规模死亡，其后蔓延到整个东部沿海地区，通过对牡蛎进行病理学分析，研究者认为引起牡蛎大规模死亡的原因是一种派金虫(perkinsus marnius