干细胞杀伤作用的体外试验研究.PDFVIP

· 26 · 中国慢性病预防与控制 2013年 2月第 2l卷第 1期 ChinJPreyContrChronDis，February2013，Vo1．21，No．1 · 论 著 · LSC—DC—CIK对慢性粒细胞白血病 干细胞杀伤作用的体外试验研究 庞华 ，孙雯雯，梁芳芳，司玉玲 ，窦金霞 天津市第四中心医院中心实验室，天津300140 摘要：目的 研究慢性粒细胞白血病(cML)患者来源的干细胞体外扩增诱导生成树突细胞(DC)，与同来源的细胞因子诱 导的杀伤细胞(CIK)共培养，对慢性粒细胞白血病细胞株K562干细胞的杀伤作用。方法 提取CML患者的骨髓单个核 细胞(BMMC)，利用流式细胞术(FCM)分选纯化白血病干细胞(LSC)CD~+CD3s-CD．+，体外扩增诱导生成LSC—DC。取同一 患者骨髓的BMMC诱导出CIK。LSC—DC与CIK共培养，用光学显微镜观察细胞形态，FCM分析LSC—DC和CIK细胞免 疫表型，荧光原位杂交(FISH)检测 BCR／ABL融合基因在LSC及 LSC—DC中的表达，FCM检测 LSC—DC—CIK对慢性粒细 胞白血病细胞株K562干细胞的杀伤及凋亡情况。结果 白血病干细胞能成功诱导为LSC—DC，其DC成熟免疫表型 CD蚰、CD CD 、CD86及受体 (HIA—DR)的表达均高于诱导前；共培养后 CIK表面标志CD3、CD、CD 的表达率高于单独 培养CIK，差异有统计学意义 (P0．O1)。LSC—DC与CIK共培养后对慢性粒细胞白血病细胞株 K562干细胞的杀伤率 (66．94％)明显高于单独培养的CIK(31．89％)，差异有统计学意义 (尸0．01oLSC—DC—CIK可诱导K562细胞凋亡，凋亡率 为52．28％±3．71％，与CIK组(37．51％±1．89％)相比，差异有统计学意义(PO．01)；但对其中白血病干细胞无明显的诱导 凋亡作用。结论 CML来源LSC—DC保留有干细胞特征 ，其与CIK共培养能杀伤慢性粒细胞白血病细胞株干细胞，但无 明显的诱导干细胞凋亡作用。 关键词：白血病；干细胞；树突状细胞；细胞因子 中图分类号：R733．7 文献标志码：A 文章编号 ：1004—6194(2013)01—0026—04 Killingeffectsofcytokines—inducedkillercellsonchronicmyelocyticleukemia(CML)stem celslinvitro PANGHua，SUNWen—wen，LIANGFang—fang，SIYu—ling，DOUJin—xia The4thCentreHospital0厂Tionfin。Tianiin300140,China Abstraet：Objeetive Toinvestigatethekillingeffectsofcytokines—inducedkillerceils(CIK)co—culturedwithdendriticcells derivedfrom chronicmyelocyticleukemia(CML)stemcellsonCMLstemcells(K562)．Methods Bonemarrowmononuclear cells(BMMC)wereisolatedfromCMLdonors．CD34+CD38-CD“cells(LSC)wereisolatedandpurifiedbyflowcytometry(FCM)， whichwereculturedandinducedtoLSC—DC．TheBMMCsrfom thesamedonorswereinducedtoCIK．LSC—DCandCIK were co—cultured．andco—cu