临床免疫试验质量管理及临床分子试验室建立-四川大学华西第二医院.PDFVIP

临床免疫实验质量管理及 临床分子实验室建立 四川大学华西第二医院 检验科 石 华 Sichuan University 乙肝五项、梅毒检测方法学 • 胶体金 • ELISA • 化学发光 • TRUST Sichuan University 方法学选择 • 1、胶体金： • 优点：快速，简单，可单份检测 • 缺点：假阴性率高 （灵敏度低，低滴度的阳性检测不出来；钩状效应 ：太高滴度的阳性检测不出来） • 用途：急诊手术，规避医务人员院感风险 • 2、ELISA ： • 优点：钩状效应远远低于胶体金 • 缺点：速度较慢 • 用途：辅助诊断，适合批量检测 • 3、TRUST： • 用途：检测梅毒非特异性抗体，用于梅毒活动期、疗效及先天性梅毒 的判断 Sichuan University ELISA实验检测注意事项 • 一、分析前控制： • 1. 血样保存：在采血后尽快完成检测，如需等待较长时间应置于2-8 度保存，超过48小时需分离血清后置-20度冻存，实验前一夜将冻存 血清转至2-8度。实验前将血清取出置室温平衡，避免反复冻存，溶 血标本不可用。 • 2. 血样及试剂从2-8度取出后置于室温平衡，尽量平衡一小时左右。 Sichuan University ELISA实验检测注意事项 • 二、分析中控制： • 1 加样：加样前应将试剂反复颠倒混匀，使用加样器加样，加样后应 振荡充分混匀。 • 2 孵育：保证水浴箱温度在36.5-37.5度。应使板架漂浮于水面，不可 放于箱内试管架上。 • 3 洗板：洗液应使用蒸馏水配制，每孔洗液不可溢流，避免交叉污染 ，加入洗液后静置20秒。每次均轻拍干，最后一次彻底拍干。 • 4 实验结束后剩余孔条应及时密封以防止包被抗体失活，尽快将试剂 盒放回冰箱。 • 5 质控品结果应在规定范围内。 Sichuan University ELISA实验检测注意事项 • 三、结果解释： • 1 由于个体差异或不明干扰因素的存在，不可避免的会有少数病例结 果与临床状态不符，此时应首先排除操作失误，仪器故障，试剂失活 等因素，之后在复检或建议重新送样。 • 2 某些项 目的检测结果会受到服用药物以及其他基础疾病的干扰，因 此必须及时与临床医生沟通，作出正确判断。 Sichuan University 乙肝两对半的检测及应用 一、乙肝两对半检测结果常见模式： • 1. ：过去和现在未感染过HBV. • 2. +:既往感染未能测出抗-HBs；恢复期HBsAg已消失，但抗-HBs尚未出现；无症 状HBsAg携带者 • 3. ++：既往感染过HBV ;急性HBV感染恢复期；少数标本仍有传染性 • 4. -+：注射过乙肝疫苗有免疫；既往感染；假阳性 • 5.-+-++：急性HBV感染后康复 • 6. ++：急性HBV感染；慢性HBsAg携带者；传染性弱 • 7. -+--+：既往感染过HBV,先病毒已基本清除，身体在康复。 • 8. +--++：急性HBV感染趋向恢复；慢性HBsAg携带者；传染性弱。俗称 “小三阳” • 9. +-+-+：急性或慢性HBV感染。提示HBV复制传染性强。俗称 “大三阳” Sichuan University 乙肝两对半的检测及应用 二、乙肝两对半检测结果少见模式： • 1. +：急性HBV感染早期，急性HBV感染潜伏期；慢性HBV携带者，传染性弱. • 2. +--+-：慢性HBsAg携带者，易转阴；急性HBV感染趋向恢复 • 3. +-+--：急性HBV感染早期；慢性携带者，传染性强 • 4. +-+++： 急性HBV感染趋向恢复；慢性携带者 • 5. ++:亚临床型HBV感染早期；不同亚型HBV二次感染 • 6. ++--+：亚临床型HBV感染早期；不同亚型HBV二次感染 • 7. ++-+-：亚临床型或非典型性感染 • 8. ++-++：亚临床型或非典型性感染 Sichuan University