动物乳腺生物反应器在现代生物制药中的应用.pdfVIP

　　　 　《黑龙江畜牧兽医 》2008年第 6期 21 动 物 乳 腺 生 物 反 应 器 在 现 代 生 物 制 药 中 的 应 用 1 2 3 杨雪峰 ,刘玉梅 ,张文娟 ( 1. 河南科技学院 动物科学学院 ,河南 新乡 453003; 2. 河南科技大学 动物科技学院 , 河南 洛阳 47 1003; 3. 西北农林科技大学 动物医学院 ,陕西 杨凌 7 12 100) 中图分类号 : S85979 + 7 文献标识码 : A 文章编号 : 1004 7034 (2008) 06002 102 　　目的基因在乳腺中表达的转基因动物称为动物 物活性外源蛋白。因此 ,动物乳腺生物反应器在现代 ( ) 乳腺生物反应器 m amm ary gland b ioreactor ,又称为 生物制药领域中具有广阔的开发前景 。 动物个体乳腺表达系统 。动物乳腺生物反应器出现 1　动物乳腺生物反应器的原理 于 20世纪 90年代初 ,它是一项利用转基因动物的乳 动物乳腺生物反应器的原理是应用重组 DNA 技 房代替生物发酵 ,大规模生产供人类疾病治疗和保健 术和转基因技术等 ,先将外源基因置于乳腺特异性调 用的生物活性物质或药用珍稀蛋白的现代生物技术 , 控序列之下 ,再将该基因转移到尚处于原核阶段或 其核心内容是利用乳蛋白基因的乳腺特异性调控成 1～2细胞的受精卵的动物胚胎中,经胚胎移植得到转 分驱动外源基因在动物乳腺中高效表达 , 以期通过源 基因乳腺表达的动物个体 ,通过回收乳汁获得表达产 源不断地回收乳汁来提取大量有重要药用价值的生 物 。用转基因动物生产药用蛋白的基本过程见图 1。 　　药用蛋白基因 →表达细胞株 →细胞核 　　　　　　　　　　　　　受体动物 　　　　　　　　　　　　　　　　 ↓　　　　　　　　　　　　　　　　 ↓ 　　　　供体动物 →受精卵 →无核受精卵 →组装的核细胞 →多细胞胚胎 →假孕动物 →动物幼崽 →雌性转基因动物 →乳汁 →药用蛋白 ( ) 图 1　用转基因动物生产药用蛋白的基本过程 资料来源于参考文献 [ 1 ] 　　提高外源基因表达量的关键在于乳腺生物反应 Gordon K等人建立了第一例乳腺生物反应器小鼠模 器表达载体的构建 。外源基因在乳腺组织中特异性 ( ) 型 ,并利用组织型纤溶酶原激活剂 tPA 与小鼠乳清 表达需要乳蛋白基因的一个启动子和调控区 ,即引导 ( ) 酸蛋白 WA P 基因的启动子构建了重组基因 ,成功 泌乳期乳蛋白基因表达的序列 。目前 ,用于转基因动 地培育出了 37 只在乳汁中能表达 tPA 的转基因小 物乳腺生物反应器的调控元件主要有 β- 乳球蛋白 鼠,此研究结果显示用动物乳腺生物反应器生产高附 ( ) β 基因 BL G 调控序列 、 - 酪蛋白基因调控序列 、乳 加值药用蛋白的可能性 。此后 ,将乳腺生物反应器作 ( ) 清酸蛋白基因 WA P