HIV检测和临床意义.pptVIP

2019 ppt资料 * 欢迎批评指导！！ 快乐工作，快乐生活！ 感谢您的聆听！ ！ HIV感染后抗原和抗体的变化及其与疾病关系 HIV感染人体后出现一过性病毒血症，6-8周后血清抗体阳转，病毒滴度降低，在随后的5-8年无症状带毒期里HIV抗体一直存在，但病毒难查到。进入AIDS期后血浆中病毒再次出现。 故诊断HIV感染多数时间用抗体检测诊断，极早期（窗口期）用抗原检测。 HIV抗体诊断 目前临床上实际应用的是测定特异性HIV抗体，包括初筛和确认实验。 一、检测试剂 筛查试剂必须是HIV-1/2混合型、经国家药品监督管理局注册批准、批批检合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。 目前常用的筛查试剂有酶联免疫、颗粒凝集和其它快速诊断试剂。采供血机构进行血液筛查应采用酶联免疫试剂。 自采自供血的单位必须进行HIV抗体检测，在尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区可由经过培训的技术人员在规定的场所用快速试剂进行血液筛查。 2、确认试剂必须经国家药品监督管理局注册批准。确认试剂包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验试剂。目前以免疫印迹试剂最为常用。 ELISA方法： 目前最常用的初筛实验，自1985年首次检测HIV-1抗体的试剂盒供市以来，已从第一代的全病毒抗原间接法发展到第四代的以重组的多肽抗原及抗P24抗体包被的双夹心法，使窗口期缩短了2-3周。 四代艾滋病酶联免疫试剂比较 solid phase specific detection of conjugate 第一代 病毒裂解液 HIV-1 IgG 抗体 HIV-1 -IgG抗体 第二代 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 IgG 抗体 HIV-1 / -2 IgG抗体 第三代 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O IgM / IgG 抗体 HIV-1 / -2 / -O 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O 第四代 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O anti-p24 Ab IgM / IgG 抗体 HIV-1 / -2 / -O p24 抗原 病毒裂解液 重组抗原合成肽 HIV-1 / -2 / -O anti-p24 抗体 检测结果的报告和处理 阴性反应出具HIV抗体阴性报告， 如果近期有高危行为，如性乱、注射毒品等，或有急性流感样症状等情况，为排除“窗口期”的可能，可以进行HIV-1 P24抗原或HIV核酸检测，或2－3个月以后再做抗体检测。 筛查实验呈阳性发现反应，可出具“HIV抗体待复查”的报告，不能出阳性报告。 样　　本 初筛检测 一阴一阳 均阳性反应 阴性报告 送确认 重复检测 阴性报告 均阴性反应 阳性反应 原有试剂＋另一 种原理初筛试剂 选用初筛试剂 阴性反应 HIV抗体初筛检测流程图 快速诊断试剂： 采用乳胶凝集、免疫斑点和免疫层析三种原理 快速、不需特殊仪器 敏感度、特异度低于ELISA，且价格贵 适用于血站覆盖不到的边远地区/城市大医院急诊手术前检查 快速诊断阳性结果还需经ELISA方法验证 HIV抗体确认 常用的确认实验方法是免疫印迹法（WB）。 免疫印迹试剂有HIV-1/2混合型和单一型。一般先用HIV-1/2混合型试剂进行检测 蛋白印迹实验（WB） ——广泛使用的确认实验 用聚丙烯酰胺凝胶电泳将纯化的HIV蛋白抗原分开后转移到硝酸纤维膜上。标本中存在的HIV抗体与条带上的抗原结合，再加入酶偶联的抗人IgG抗体和底物，在抗原抗体结合的部位会出现有色条带 其可检测标本中针对HIV不同抗原的抗体，故被用做确认试剂。 不同的研究机构有不同的判定标准 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? HIV抗体确认检测流程图 免疫印迹法(HIV1/2混合型) HIV-1阳性反应 可疑反应 出现HIV-2指带 HIV-1阳性报告 可疑反应 阳性反应 阴性反应 报告HIV-2血清学阳性反应报告必要时测核酸 阴性报告 免疫印迹法（HIV-2） 每3个月随访一次，共2次，仍属可疑，则作阴性报告如随访期间出现阳性反应则报告阳性 阴性反应 阴性报告 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? P24抗原测定 （一）适用范围 HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断。 HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。 第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应， 但HIV-1抗体确认阴性者的诊断。 监测病程进展和抗病毒治疗效果。 （三）结果报告和解释 1、HIV-1 P24抗原的阳性结果必须经过中