流式淋巴细胞亚群检测技术原理.pptVIP

T4/T8细胞比值临床意义 器官移植受者免疫功能监测 个体化免疫治疗疗效判断 受者需要的是一种恰当的免疫抑制，将免疫功能控制在较低的一个范围内。 需要经常性监测受者的免疫功能，T4/T8细胞比值是非常好的一个监测指标 当受者T4/T8细胞比值出现小于0.2的情况时，必须立即停用免疫抑制药，等待免疫功能的适当恢复 T4/T8细胞比值与肿瘤 恶性肿瘤患者术前T4/T8细胞比值低，手术后比值恢复正常 当发生癌转移时,T3、T4细胞数明显减少的同时T8细胞数明显增多 T4/T8比值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免疫功能更低,预后更差 产生抗体 提呈抗原 ③免疫调节 B细胞的功能 B细胞增高 提示机体体液免疫功能被增强 此时体内高亲和力抗体的产生也增加 见于临床各种细菌性感染 B细胞增高也见于B细胞白血病 B细胞减少 见于原发及继发性免疫功能低下，临床可出现反复发作的呼吸道及消化道感染 见于严重病毒性感染、使用免疫抑制剂制药等情况 见于原发性B细胞缺陷病（如性联无丙种球蛋白血症）和重症联合免疫缺陷（T细胞同时缺如） 体液免疫功能不良者则减少 在生命垂危时可呈现极度减少 自然杀伤细胞 表面标记 CD3-、CD56+、CD16+ 表面受体 （1）杀伤细胞活化受体（KAR） 结合靶细胞表面糖类配体，促使NK发挥杀伤作用。 （2）杀伤细胞抑制受体（KIR） 识别自身细胞表面MHC-I类分子，产生抑制信号 无须致敏即直接杀伤靶细胞,抗感染与抗肿瘤,免疫调节 NK细胞作用及效应机制 抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC） 天然细胞毒性 NK细胞介导的凋亡 NK细胞产生的细胞因子 NK细胞受体 NK细胞通过ADCC作用杀伤病毒感染的靶细胞 NK细胞杀伤靶细胞电镜图 NK细胞 NK细胞是机体抗某些病毒、细菌、寄生虫、真菌感染的重要免疫因素，NK细胞异常在病毒感染时尤其突出。 NK细胞减少见于萨科奇病毒、脑心肌炎病毒、流感病毒、EB病毒、HSV-Ⅰ型等感染。 NK细胞也参与Ⅱ型超敏反应和移植物抗宿主反应，IL-2治疗后外周血NK细胞数量增加。 NK细胞 NK细胞与肿瘤性疾病的发生、发展和转归密切相关 一般而言，肿瘤患者NK细胞数量较正常人减少，且减少的程度与肿瘤病情的严重程度密切相关，病情好转，NK细胞数量回升 因此，NK细胞数量是肿瘤临床病情判断、疗效监测的指标。 淋巴细胞亚群检测适用人群 肿瘤病人化疗过程中 活动期的自身免疫病患者 器官移植患者 血液病患者（白血病） 免疫功能低下患者（幼儿/老人/免疫抑制剂/抗精神药物/放化疗等） 急慢性肝炎患者 呼吸道感染患者 胰岛素依赖型糖尿病患者 谢谢大家！ 2019 ppt资料 * 欢迎批评指导！！ 快乐工作，快乐生活！ 感谢您的聆听！ ！ T和B细胞是发挥核心作用的免疫细胞，分别负责细胞免疫和体液免疫，称免疫活性细胞（ICC）。NK细胞不需要预先接触抗原，就能杀伤某些被病毒感染的宿主细胞和肿瘤细胞，在抗病毒感染抗肿瘤方面发挥天然免疫的作用。 CD45 能标记白细胞，可以去除红细胞，以及其他碎片的干扰。通过45标记后再分析45标记后的淋巴细胞表达，如果不存在CD45，有可能有细胞碎片，无法排除对淋巴细胞的干扰，所以联合CD45 器官移植受者口服免疫抑制剂类药物，目的在于抑制机体免疫功能，防止移植排斥发生，确保移植器官的长期存活，但是受者免疫功能抑制过度，极易发生感染，一样将导致移植失败。 ，抗癌药物对同样处于增殖状态的、对肿瘤敏感的活化淋巴细胞也有杀伤作用，甚至免疫功能严重损毁。 ，必然表现为淋巴细胞亚群绝对值和活化淋巴细胞百分比的明显异常。 淋巴细胞亚群检测 目录 1 淋巴细胞的分类 2 淋巴细胞亚群检测方法 3 淋巴细胞亚群检测原理 4 淋巴细胞亚群的免疫功能 5 淋巴细胞亚群的临床意义 T淋巴细胞 细胞免疫 B淋巴细胞 体液免疫 NK细胞 固有免疫 淋巴细胞的分类 淋巴细胞占外周血白细胞总数的20%-40% 检测方法 采用流式细胞术（FCM） 是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞(或生物学颗粒)的理化特性进行多参数定量分析和分选的技术 FCM 检测对象：单细胞悬液或生物颗粒； 检测参数：多参数； 检测特点：单细胞水平分析； 检测速度：高速，最高达上万个细胞/秒； 检测结果：精度高、准确性好； 可对目标细胞进行分选； 荧光抗体 直接标记 第一抗体 荧光二抗 间接标记 免疫荧光染色主要有两种方法。间接标记的方法难以进行多色标记，而且操作复杂，所以一般首选直接荧光染色 检测原理 常用荧光素 499nm 蓝色荧光（Blue） 500-549nm，绿色荧光（Green） 550-584n