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225 JOUR AL OF CHI ESE BIOTECH OLOGY 2002 10
钟 辉 彭英芳 李 平 袁志刚 杨晓莉 马清钧
( 100850; 100039)
降钙素(Calcitonin,CT) 和骨生长肽(Osteogenic growth peptide,OGP) 是两种治疗骨质疏
松症的药物, 设想通过这两种基因的融合表达 达到治疗骨质疏松的目的体外合成OGP
和sCT 的基因, 经过D A 体外重组构建酵母表达质粒, 实现了在毕赤酵母中的表达, 通过纯
化后进行氨基酸 端测序, 证明表达的蛋白序列正确
降钙素 骨生长肽 骨质疏松症 毕赤酵母
, 12
: 15kV, 330F,
, 400
[ 1] [4]
, D A
, 13
32 10~ 20 50ml
, ,, 10mlBMGY ,30 ,(
(Salmon calcitonin, SCT) 200rmin) ( ) ,4000r
[2]
14 min10min , ,
, , 2mlBMMY ,224h
[3]
SCT OGP SDS ,
, Invitrogen
14 TrisTricine SDSPAGE
, 6000 ,
, TrisTricine SDSPAGE ,
Tricine
3!1,
1
30V, ,
[4]
11 60~ 70V,
Pichia GS115:His , 15
YPD , + ( ) ,
; His GS115 , ,(MW= 10000) ,
MD 20mmolL PBS(pH74) ,
DH5: 4 2 ,
Pichia 1, 1
+
PPIC9:His AmpR
80
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