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上海科研技术共享平台
------ChIP染色质免疫共沉淀服务注意事项
服务项目：
染色质免疫沉淀 (ChIP) 处理
ChIP-Real Time PCR (CRTP)解析
ChIP-SEQ高通量测序解析.
二．技术主要应用于：
组蛋白修饰研究
转录调控分析
药物开发研究
有丝分裂研究
DNA损伤与凋亡分析。
三. 基本步骤： 1）甲醛处理细胞 2）收集细胞，超声破碎 3）加入目的蛋白的抗体，与靶蛋白-DNA复合物相互结合 4）加入ProteinA，结合抗体-靶蛋白-DNA复合物，沉淀 5)对沉淀下来的复合物进行清洗，除去一些非特异性结合 6)洗脱，得到富集的靶蛋白-DNA复合物 7)解交联，纯化富集的DNA-片断 8)PCR或基因芯片分析
注意事项：1.客户告知实验分组、编号及背景设计资料，有具体要求请事先说明； 2.抗体：事先咨询本科研平台，明确抗体种属以及是否有该抗体可使用，如有一抗使用另加使用费，如无可由双方协商而定，客户自己购买提供或本实验室代购； 3.标本收集与保存： 组织样品 新鲜组织放入液氮或-70度保存，组织不少于100mg（约绿豆大小）； 培养细胞 通过细胞计数取不少于2000000个细胞于EP管，加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，混匀后保存于冰箱（-70℃，避免反复冻融）； 血液细胞标本 以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，保存（-70℃可长期保存，避免反复冻融） 血清或细胞培养液标本 离心去掉杂质后取上清入EP管，保存（以上4℃可保存15-20天，-70℃可长期保存，避免反复冻融） 4.样本运输：可选以下任何的一种方式寄送标本 组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输； 细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶（密封保证不污染，培养液不漏出，细胞不要长得太满，50%左右，灌满培养液）； 血清或上清液直接加冰袋寄送（密封保证液体不漏出，视路途远近2-3天可到达）
五．预约方式与收费标准
1.服务时间：周一至周五下午2:00-5:00。节假日除外。
2.每个标本收费6800元，三个以上6000元，10个以上另议。
2.联系方式：宋老师QQ2293446234,songjing1214@sina.cn
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